- ￥3000
- SAIOS（赛奥斯）
- 中国,武汉
- CL-765h
- 2026年03月30日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
H660; H-660; NCIH660; NCI660
- 库存：
999
- 物种来源：
人
- 细胞形态：
圆形细胞
- 运输方式：
常温/干冰
- 生长状态：
悬浮和部分贴壁
- 规格：
1×10⁶cells
NCI-H660 人神经内分泌前列腺癌细胞
产品编号：CL-765h
一、细胞简介
NCI-H660 是一种上皮神经内分泌细胞，是从一名 63 岁白人癌症男性患者的前列腺中分离出来的。该细胞系由 AF Gazdar 和 JD Minna 保藏，可用于癌症研究。虽然 NCI-H660 具有小细胞癌的外观和许多特性，但也存在差异。NCI-H660 表达升高水平的左旋多巴羧化酶和铃蟾肽样免疫反应性。这些细胞表达功能性心房钠尿肽 (ANP) 受体，但添加 ANP 不会对细胞的生长模式产生可检测到的变化。
二、细胞特性
来源：63岁白人 男性 前列腺
形态：圆形细胞，悬浮和部分贴壁细胞
含量：1x10⁶cells
规格：T25瓶x1（常温运输）/2mL冻存管x2（干冰运输）
用途：本产品仅供实验室研究使用，不可用于动物或人类治疗或诊断用途
三、完全培养基配制
1) 该细胞完全培养基为：92%RPMI-1640＋5%FBS＋1%GlutaMAX-1＋1%ITS＋1%P/S＋10nM氢化可的松＋10nM雌二醇
2) 培养环境：37℃；95% Air，5% CO₂；湿度为70%～80%
3) 冻存液：推荐使用非程序无血清细胞冻存液（货号：RC-0102）
四、细胞接收注意事项
1) 收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染，冻存细胞若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落，请拍照后及时与我们联系。
2) 75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于培养箱静置约2-3h。在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜）下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 对于半贴细胞和贴壁不牢（悬浮）细胞：①静置后显微镜下观察细胞生长情况，若细胞密度未超过80%，可收集T25瓶中的悬浮细胞，离心后用完全培养基重悬打回到原培养瓶中继续培养。②若细胞密度超过80%，可进行传代处理，传代时需要收集培养基中悬浮的细胞。首次传代，建议 1:2 传代（两个T25）。
细胞培养操作说明
一、细胞复苏
1. 将含有1mL细胞悬液的冻存管快速放入37℃水浴中，摇晃冻存管加速解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%酒精擦拭冻存管外壁。
2. 将冻存管内容物加入含有5mL完全培养基的离心管中混合均匀，1000rpm离心5min。
3. 弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞，接种到含有6-8mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱中培养。
4. 第二天换液并检查细胞密度。
注意：在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和佩戴防护面罩，避免冻存管爆炸造成人员伤害。
二、细胞传代：对于半贴细胞和贴壁不牢（悬浮）细胞，密度达到70%～90%，即可进行传代
1. 收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2min（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后，加5mL以上含10%FBS的完全培养基终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、PBS清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpm离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1: 2~1: 5的比例进行。
三、细胞冻存
收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。步骤如下：
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清，用细胞冻存液重悬细胞，按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞放入-80℃冰箱中，24h后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项：
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全柜内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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