DC2.4小鼠树突状细胞
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DC2.4小鼠树突状细胞

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  • SAIOS(赛奥斯)
  • 中国,武汉
  • CL-036m
  • 2025年12月12日
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    • 详细信息
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    • 英文名

      Mouse Dendritic Cells

    • 库存

      999

    • 物种来源

      小鼠

    • 细胞形态

      上皮细胞样,短梭形,圆形

    • 运输方式

      常温/干冰

    • 生长状态

      半贴壁半悬浮生长

    • 规格

      1×10⁶cells

    DC2.4 小鼠树突状细胞

    产品编号:CL-036m

    一、细胞介绍

    DC2.4是通过用表达鼠粒细胞-巨噬细胞CSF (GM-CSF)和myc和raf癌基因的逆转录病毒载体转导C57BL/6小鼠的骨髓分离物而产生的永生化鼠树突细胞。DC2.4表现出树突细胞的特征,包括细胞形态和树突细胞特异性标记的表达,以及吞噬和呈递MHC类和II类分子上的外源性抗原的能力。树突细胞(DC)是免疫系统的抗原呈递细胞,在大多数组织中发现,特别是那些与外部环境接触的组织(例如,皮肤和鼻、肺、胃和肠的内层)。最早于1973年描述,树突状细胞的主要功能之一是吞噬外来病原体,并将加工后的抗原呈递至幼稚T细胞,以调节适应性免疫反应。树突状细胞还表达Toll样受体,并帮助调节先天免疫反应。尽管它们分布在大多数组织中,但DC在体内数量很少,并且在体外难以维持。这些困难限制了树突细胞的研究。

    二、细胞特性

    来源:C57BL/6小鼠骨髓

    形态:上皮细胞样,短梭形,圆形,半贴壁半悬浮生长

    含量:>1x10⁶cells

    规格:T25瓶x1(常温运输)/ 含有1mL细胞悬液的冻存管x2(干冰运输)

    用途:本产品仅供实验室研究使用,不可用于动物或人类治疗或诊断用途

    三、完全培养基及冻存液配制

    1) 该细胞完全培养基为:90%RPMI-1640+10%FBS+10ng/m鼠GM-CSF

    2) 培养环境:37℃,95% Air,5% CO₂;培养箱湿度为70%~80%

    3) 冻存液:推荐使用非程序无血清细胞冻存液(货号:RC-0102)

    四、收货注意事项

    1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染,冻存细胞若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落,请拍照后及时与我们联系。

    2) 75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱静置约2-3h,在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4x或5x物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10×和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

    3) 对于半贴壁半悬浮细胞:静置2-3h后,若细胞密度超过 80%,则可以根据提供的细胞培养步骤进行传代或冻存;若细胞密度未达到 80%,在无菌条件下,将原瓶培养液转移到离心管中。1000-1200 rpm/min离心5-10分钟后重悬细胞,转移悬浮细胞到原T25瓶中,补加完全培养基到10mL,放入培养箱中继续培养。

     

    细胞培养操作说明

    一、细胞复苏

    1. 将细胞冻存管快速放入37℃水浴中解冻,轻轻摇晃加速溶解,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁。

    2. 将冻存管内容物加入含有9mL完全培养基的离心管中,1000-1200rpm离心5min。

    3. 弃去上清液,用1-2mL完全培养基重悬细胞,接种到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱中培养。

    注意:在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和佩戴防护面罩,避免冻存管爆炸造成人员伤害。

    二、细胞传代:细胞密度达80%~90%,即可进行传代

    1. 将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 1-2mL 胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);

    2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落、吹散;

    3. 将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,放入培养箱中培养。

    4. 注意培养基 pH 值变化和细胞密度,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%~90%时,重复传代操作或者冻存。

    注意事项:细胞具有密度依赖性,首次传代(密度达到 80%),建议1:2 传代(保持细胞密度),且优先在 T25 瓶中。密封培养瓶的话,处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松。

    三、细胞冻存

    收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。步骤如下:

    1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。

    2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清,用细胞冻存液重悬细胞,按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

    3. 将要冻存的细胞放入-80℃冰箱中,24h后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

    注意事项:

    所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全柜内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    Shen Z.-H., Reznikoff G.A., Dranoff G., Rock K.L.
    Cloned dendritic cells can present exogenous antigens on both MHC class I and class II molecules.
    J. Immunol. 158:2723-2730(1997)

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