- ￥1350
- SAIOS（赛奥斯）
- 中国武汉
- CL-034e
- 2026年01月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
V79
- 库存：
999
- 物种来源：
仓鼠
- 运输方式：
常温/干冰
- 规格：
1×10⁶cells
一.细胞介绍
该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系，患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
二.细胞特性
（1）来源：仓鼠
（2）形态：成纤维细胞样；贴壁生长
（3）含量：>1x10⁶cells
（4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
（5）用途：仅供科研使用。
三.培养基及培养冻存条件准备
（1）准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，20%；双抗，1%。
（2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
（3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
四.运输和保存
（1）冻存细胞：1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）复苏好的活细胞：T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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细胞接收后的处理：
（1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
（2）请在4或5x显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
（3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
（4）注意：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。
细胞处理：
（1）冻存细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
（2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
（3）细胞冻存：收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面以T25瓶为例：
（1）细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
（2）1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
（3）将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存，同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验Ford D.K., Yerganian G.
Observations on the chromosomes of Chinese hamster cells in tissue culture.
J. Natl. Cancer Inst. 21:393-425(1958)
体外哺乳类细胞（V79/HGPRT）基因突变试验－ 中华仓鼠肺细胞染色体突变实验
受试物的致突变性。 3 材料和试剂 3.1 细胞：使用中国仓鼠肺（v79）细胞株。为了减少自发突变率，正式实验前先将野生型细胞群体中存在的自发HGPRT座位突变体选择性杀灭，方法是将野生型细胞接种于含次黄嘌呤及胸腺嘧啶，氨甲氨甲喋呤，甘氨酸的MEM培养液中培养1周，然后重新接种于MEM培养液中。 3.2 培养液：采用MEM（Eagle）基础培养液或DMEM培养液，补以10％小牛血清及适量抗菌素（青霉素，链霉素）。 3.3 磷酸缓冲液（无钙、镁PBS） 磷酸二氢钾
细胞 2.大鼠类 BRL 肝细胞 LW-3 肝细胞 BRL 3A 肝细胞 NRK 肾细胞 L-6TG 肌母细胞 3.仓鼠类 BHK 幼仓鼠肾 V79 中国仓鼠肺细胞 CHL 中国仓鼠肺细胞 CHO 中国仓鼠卵巢细胞 R1610 中国仓鼠体细胞 *CHO/dhFr- 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO 4．人类 2BS 胚肺 XJH B淋巴细胞 HLF 胚肺 L-02 肝细胞
体外哺乳类细胞基因突变（HGPRT）试验原理及注意事项 In vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test 【试验原理】 体外哺乳动物细胞基因突变试验是利用培养的哺乳动物细胞作指示生物的体外遗传毒理学试验，可用于检测有化学物质诱导的基因突变，适用的细胞系包括小鼠淋巴瘤细胞（L5178Y），中国仓鼠肺细胞（V79），中国仓鼠卵巢细胞（CHO），人类淋巴母细胞（TK6）等。这些细胞系，常用的遗传学终点是检测胸苷激酶（TK）图标，次黄嘌呤鸟嘌呤转磷酸
