- ￥2500
- SAIOS（赛奥斯）
- 中国,武汉
- CL-187h
- 2026年04月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Human Malignant Non-Hodgkins Lymphoma Patients With Natural Killer Cells
- 库存：
99
- 物种来源：
人
- 细胞形态：
淋巴母细胞
- 运输方式：
常温/干冰
- 生长状态：
悬浮生长
- 规格：
1×10⁶cells
一.细胞介绍
NK-92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。NK-92细胞有以下特征： CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面标记阳性，CD56亮；CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20, CD23, CD34和HLA-DR表面标记阴性。
二.细胞特性
（1）来源：恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞
（2）形态：淋巴母细胞,悬浮生长
（3）含量：>1x10⁶cells
（4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
（5）用途：仅供科研使用。
三.培养基及培养冻存条件准备
（1）MEMα(+0.2mM Inositol（肌醇） +0.1mM β-mercaptoethanol （β巯基乙醇）β+0.02mM Folic Acid（叶酸）+100-200U/mL recombinant IL-2白介素+12.5% HS(HYCLONE马血清）+12.5% FBS+1% P/S
（2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
（3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
四.运输和保存
（1）冻存细胞：1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）复苏好的活细胞：T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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细胞接收后的处理：
（1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
（2）请在4或5x显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
（3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
（4）注意：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。
细胞处理：
（1）冻存细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
（2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
（3）细胞冻存：收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面以T25瓶为例：
（1）细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
（2）1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
（3）将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存，同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验Gong J.-H., Maki G., Klingemann H.-G.
Characterization of a human cell line (NK-92) with phenotypical and functional characteristics of activated natural killer cells.
Leukemia 8:652-658(1994)
三句话读懂一篇 CNS！首次提取超 100 万年的 DNA；轻轻一喷，瞬时改变作物性状...
见的非霍奇金淋巴瘤形式。在美国，每年估计有 27,000 名新确诊的弥散性大 B 细胞淋巴瘤患者，其中约有 6,500 名患者在二线或以上治疗后复发或难治。 2021 年 2 月 20 日，宾夕法尼亚大学艾布拉姆森癌症中心 Elise A. Chong 等研究人员在 NEJM 上发表研究论文 Five year outcomes for refractory B-Cell Lymphomas with CAR T-cell Therapy，该工作报告了 嵌合抗原受体（CAR）T 细胞疗法治疗非霍奇金淋巴瘤
之一。它通过从患者体内提取 T 细胞，利用基因工程技术在 T 细胞表面嵌入嵌合抗原受体（CAR），使其能够特异性识别并攻击癌细胞。CAR-T 细胞疗法已在急性淋巴细胞白血病（ALL）、非霍奇金淋巴瘤（NHL）等血液肿瘤中取得了显著疗效。 自然杀伤细胞（NK 细胞）：NK 细胞是先天免疫系统的一部分，具有天然的抗肿瘤和抗病毒感染能力。与 T 细胞不同，NK 细胞不需要预先激活即可直接识别并杀死肿瘤细胞。近年来，NK 细胞疗法在实体瘤治疗中展现出巨大潜力，尤其是在卵巢癌、乳腺癌和前列腺癌等疾病中。 树突状细胞（DC
实验证实，IFN-γ通过激活特定免疫细胞通路抑制肿瘤生长，而非直接作用于肿瘤细胞本身。 图 2. 单细胞测序解析有/无 LM 患者的脑脊液细胞组成和细胞密度图 单细胞测序进一步揭示，软脑膜中的 T 细胞是 IFN-γ的主要来源，其通过 IFN-γ信号促进传统树突状细胞（cDC2）成熟为迁移性 CCR7+树突状细胞（DCs）。这些 DCs 可独立于抗原呈递过程，通过分泌细胞因子 IL-12 和 IL-15 激活自然杀伤细胞（NK 细胞），进而发挥抗肿瘤效应。 动物实验显示，敲除 IFN-γ或其受体
