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- YLKBIO
- YLK-XB1606
- 上海
- 2025年12月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
恶性黑色素瘤
- 细胞类型：
细胞系
- 肿瘤类型：
恶性黑色素瘤
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
A 375; A375; A375-MEL; A375-mel; A375mel
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
皮肤
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
皮肤
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
A-375细胞源自一位54岁女性，是由D·J·Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A-375细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤；A-375在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。
细胞英文名称：A 375; A375; A375-MEL; A375-mel; A375mel
细胞中文名称：A-375 人恶性黑色素瘤细胞带鉴定
形态特性：上皮细胞样
生长特性：贴壁培养
| 名称 | A-375 (人恶性黑色素瘤细胞) (STR鉴定正确) |
| 别称 | A 375; A375; A375-MEL; A375-mel; A375mel |
| 种属 | 人类 |
| 年龄（性别） | 女性，54岁 |
| 组织来源 | 皮肤；恶性黑色素瘤 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 背景描述 | A-375细胞源自一位54岁女性，是由D·J·Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A-375细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤；A-375在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。 |
| 生长培养基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 倍增时间 | ~24-32小时 |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃ |
| 致瘤性 | Yes, in immunosuppressed mice. |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-1619 ATCC; CRL-7904 BCRC; 60039 BCRJ; 0278 |
STR位点信息
| Amelogenin | X | D21S11 | 29,30 |
| CSF1PO | 11,12 | FGA | 23 |
| D2S1338 | 16,24 | PentaD | 9,15 |
| D3S1358 | 15,17 | PentaE | 10,12 |
| D5S818 | 12 | TH01 | 8 |
| D7S820 | 9 | TPOX | 8,10 |
| D8S1179 | 11,14 | vWA | 16,17 |
| D13S317 | 11,14 | D1S1656 | 16,17.3 |
| D16S539 | 9 | D6S1043 | 11,14 |
| D18S51 | 12,17 | D12S391 | 18,21 |
| D19S433 | 13,14.2 |
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
A-375 人恶性黑色素瘤细胞带鉴定收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染，很多站友，特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验，在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项：1. 细胞瓶身：如果瓶身上没有裂缝，正常；如果瓶身上有裂缝，则污染几率非常大。2. 培养基颜色：如果培养基颜色是红色或者粉色，正常；如果是橙色，则可能是污染或者细胞过密；如果是黄色，则污染几率非常大。3. 培养基澄清度：如果培养基澄清，正常；如果有少许漂浮物，则可能是污染或者有细胞凋亡；如果培养基很浑浊，甚至出现絮状物，则污染
手把手教你单细胞测序分析时如何运用多种数据库和参考文献定义每种类型的细胞群。
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