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- KEMOBIO
- 详见说明书
- 进口/国产
- KMEHu013339
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1~100
- 供应商：
温州科淼生物科技有限公司
- 检测范围：
详见说明书
- 检测方法：
酶联免疫法(ELISA)
- 应用：
仅供科研，不得用于临床诊断
- 适应物种：
人
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织匀浆等
- 规格：
48T/96T
温州科淼生物科技有限公司(Whenzhou KeMiao Biological Technology Co.,Ltd)是一家专业从事“产品研发生产，市场销售，技术服务”为一体的高科技生物技术公司，致力于为科研实验服务，主要产品为抗体、试剂盒、细胞、生化试剂等其他相关试剂。
酶联免疫检测试剂盒(ELISA kit)是一种可以快速、方便、准确的检测样品中靶蛋白的研究工具，被用于许多重要的研究领域，包括癌症、心血管、细胞生物学、表观遗传学、新陈代谢、免疫学、神经科学、信号转导等。
科淼生物的ELISA试剂盒，采用三轮质检方式，保证了试剂盒最小的批内差、批间差。试剂盒组分经过重重优化，每个组分的稳定性都经过高温破坏测验，避免了长途运输和保存过程中抗原抗体的失活。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)来检测样品的浓度。往预先包被捕获抗体的包被微孔中，依次加入样本、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。再用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与检测样品中检测物的浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中检测物的含量。
试剂盒组成
| 名称 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
|---|---|---|---|
| 酶标板(可拆卸) | 1×48 | 1×96 | 2-8℃ |
| 标准品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃ |
| 酶标试剂 | 5ml×1瓶 | 10ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 样品稀释液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 显色剂A液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 显色剂B液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 20倍浓缩洗涤液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 封板膜 | 2片 | 2片 | |
| 密封袋 | 1个 | 1个 | |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
1.酶标仪(450nm波长滤光片)
2.高精度移液器，EP管及一次性吸头
3.37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
4.吸水纸
操作步骤
1.标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
4.温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
7.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
8.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
Elisa试剂盒特点
1.高效、灵敏、特异的抗体；
2.稳定的重复性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
4.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
5.操作步骤简单，经济实惠。
号外号外：科淼生物ELISA试剂盒，可提供免费代测啦，详情请扫码咨询客服小姐姐。
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文献和实验一、ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检
常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶（HRP），底物通常为四甲基联苯胺（TMB）和邻苯二胺（OPD），其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯（DAB）和联苯醌。当pH值为5.0左右时，DAB在450nm波长处有最大吸收，当pH值降为L 0时，最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，如果HRP量少，H:O:和TMB过量时，则形成蓝色
IgM（其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM）。然后加入抗原，此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用，呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的早期诊断。甲型肝炎病毒（HAV）抗体的检测模式见图2-7。 类风湿因子（RF）同样能干扰捕获包被法测定IgM抗体，导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐，用这类试剂检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。 2.2.7 ABS-ELISA法 ABS为亲和
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