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- KEMOBIO
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- KMEHu012399
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1~100
- 供应商：
温州科淼生物科技有限公司
- 检测范围：
详见说明书
- 检测方法：
酶联免疫法(ELISA)
- 应用：
仅供科研，不得用于临床诊断
- 适应物种：
人
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织匀浆等
- 规格：
48T/96T
温州科淼生物科技有限公司(Whenzhou KeMiao Biological Technology Co.,Ltd)是一家专业从事“产品研发生产，市场销售，技术服务”为一体的高科技生物技术公司，致力于为科研实验服务，主要产品为抗体、试剂盒、细胞、生化试剂等其他相关试剂。
酶联免疫检测试剂盒(ELISA kit)是一种可以快速、方便、准确的检测样品中靶蛋白的研究工具，被用于许多重要的研究领域，包括癌症、心血管、细胞生物学、表观遗传学、新陈代谢、免疫学、神经科学、信号转导等。
科淼生物的ELISA试剂盒，采用三轮质检方式，保证了试剂盒最小的批内差、批间差。试剂盒组分经过重重优化，每个组分的稳定性都经过高温破坏测验，避免了长途运输和保存过程中抗原抗体的失活。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)来检测样品的浓度。往预先包被捕获抗体的包被微孔中，依次加入样本、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。再用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与检测样品中检测物的浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中检测物的含量。
试剂盒组成
| 名称 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
|---|---|---|---|
| 酶标板(可拆卸) | 1×48 | 1×96 | 2-8℃ |
| 标准品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃ |
| 酶标试剂 | 5ml×1瓶 | 10ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 样品稀释液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 显色剂A液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 显色剂B液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 20倍浓缩洗涤液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃ |
| 封板膜 | 2片 | 2片 | |
| 密封袋 | 1个 | 1个 | |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
1.酶标仪(450nm波长滤光片)
2.高精度移液器，EP管及一次性吸头
3.37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
4.吸水纸
操作步骤
1.标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
4.温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
7.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
8.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
Elisa试剂盒特点
1.高效、灵敏、特异的抗体；
2.稳定的重复性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
4.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
5.操作步骤简单，经济实惠。
号外号外：科淼生物ELISA试剂盒，可提供免费代测啦，详情请扫码咨询客服小姐姐。
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文献和实验Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
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