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- P33590
- 2026年06月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃&-80℃
- 保质期：
3个月~12个月
- 英文名：
pX333-3×(U6-gRNA)-CBH-Cre-HA
- 库存：
999
- 供应商：
上海禾午生物科技有限公司
- 规格：
干粉&甘油菌
| 启动子 | U6 |
| 复制子 | pUC |
| 感受态 | Stbl3 |
| 培养温度 | 37度 |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞 |
| 质粒用途 | 基因敲除 |
| 片段类型 | CRISPR |
| 片段物种 | 多框空载 |
| 原核抗性 | Amp |
| pZD55-CMV-PTEN(human) |
| pEnCMV-CASP1(human)-6-FLAG-SV40-Neo |
| pX333-3×(U6-gRNA)-CBH-Cre-HA |
| pEnCMV-To-SNCA(human)-EM7-Zeo |
| pEnCMV-SMC6(human)-Myc-6×His-SV40-Neo |
| pEnCMV-WWC1(human)(2同义突变)-HA-SV40-Neo |
| PiggyBac-CMV-CACNA1C(human)(1同义突变)-EF1a-Puro |
| pEnCMV-mir18a(rat)-SV40-Neo |
| pEnCMV-TGM2(human)-3×FLAG-SV40-Neo |
| pEnCMV-CRIM1(rat)-circRNA5257-SV40-Neo |
| pEnCMV-VSVG(human)-Linker-DsRed2-SV40-Neo |
| pEnCMV-CTNND1(human)(1同义突变)-1-3×Myc-SV40-Neo |
| pmaxmCherry-CD63(rat)-Amp |
质粒均可提供详细图谱、序列、测序报告。基因合成 载体构建 病毒包装 稳转株构建
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文献和实验CRlSPR/Cas9是细菌和古生物菌用来抵抗外来质粒或噬菌体等遗传物质入侵的一种获得性免疫系统。利用CRlSPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库或者与某类功能相关的基因突变体库，通过功能性筛选和富集以及随后的PCR扩增和深度测序分析，发掘与筛选表型相关的基因，称为CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选。gRNA文库是药物筛选或靶向筛选特定通路的理想工具，gRNA文库的建立将在功能基因筛选、疾病机制研究及药物研发等方面发挥重要的功能。 CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选流程
wz王 想请教一下在microRNA实验中u6还是u6b做内参比较合适？谢谢～ 看过一些文献用的u6b，但试剂公司推荐u6～ zhujoker 看你是做的什么了？因为说实话，现在miRNA还没有一个比较合适的内参，但是你可以自己试一下到底那个好，也不用在乎那多的1000多了。 wz王 我做表达丰度差异，之前一直用u6b做内参，这次定试剂时听试剂公司说u6b逐渐要被淘汰，他们推荐u6
CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
的原件与表达 Cas9 的原件相连接，得到可以同时表达两者的质粒，将其转染细胞，便能够对目的基因进行基因操作，在 PAM (5'-NGG) 上游～3bp 进行切割，如下图所示。因此本实验的关键步骤是设计一对 20bp（不包括 NGG 在内的）完全互补的 oligo 插入到如上图所示的 filler。另 U6 启动子需要 5' 端的 G 起始转录，因此若设计的 oligo 第一个碱基非 G，需额外增加一个 G。操作详细流程1. 设计 sgRNA关于 sgRNA 的设计我们有专门开过一篇文章《一文掌握
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