品牌：简石生物
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- 详细信息
- 申请记录(9)
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 供应商：
简石生物
- 规格：
50次/200次
| 规格： | 50次 | 产品价格： | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 200次 | 产品价格： | 询价 |
产品介绍
- 快速 (2 分钟) 纯化浓缩来自 PCR、酶反应、PCR,等来源的超纯 DNA。
- 柱的设计可使 DNA 在 10µl 洗脱液中洗脱达到很高的浓度。
- 洗脱的 DNA 尤其适用于 PCR、DNA 测序、DNA 连接、内切酶消化、芯片、转染、转化等。
- 此产品仅供科研使用。
特性
- DNA 纯度 –洗脱到的高质量、纯化的 DNA 尤其适用于 DNA 测序, DNA 连接, 内切酶消化,基因芯片；
- DNA 大小 –50 bp 到 23 kb 之间；
- DNA 回收率 –一般的，可在 10 µl 的水中洗脱出 5 µg 的 DNA。对于从 50bp 到 10kb 的 DNA，回收率为 70-95% ，对于从 11kb 到 23kb 的 DNA，回收率为 50-70%；
- 样品来源 – DNA 来自 PCR, 限制性内切酶消化，等分子生物学实验。
- DNA 洗涤液使用前需按要求准确配制，添加乙醇后请在试剂瓶上做好标记。2
- 50 次反应的 DNA 洗涤液应添加 24 ml 100%的乙醇(26 ml 95%的乙醇)到6ml 的DNA洗涤液中。
- 200 次反应的 DNA 洗涤液应添加 96ml 100%的乙醇(104 ml 95%的乙醇)到24ml 的DNA洗涤液中。
- 在一个 1.5 ml 小型离心管中, 添加 2 -7 倍体积的 DNA 结合液 到每 1 体积的 DNA 样品中，混匀。
Note: 纯化柱所能容纳的样品体积为 800 µl. 所以, 如果样品体积超过 800 µl 时，纯化柱就要被多次填充和离心。 - 将混合物移至到 1 号 C 纯化柱中并套在收集管内。
- 离心 1 分钟，去除滤出液。
- 添加 200 µl DNA 洗涤液 到纯化柱中，离心 1 分钟。
- 重复步骤 4。
- 空转 2 分钟以去除残留的乙醇，以免抑制下游反应。（可选步骤）
- 直接添加 10 µl (或更多) 的 DNA 洗脱液到纯化柱基质中. 将纯化柱移置到 1.5 ml 小型离心管内离心 1 分钟来洗脱 DNA。
Note：从纯化柱中洗脱的 DNA 产量与 pH 值和温度相关。若使用水进行洗脱，需确保水的 pH 值大于 7.5。向纯化柱中加入水后静置 1 分钟，可提高较大片段（> 6 kb）DNA 的产量；而将水预热至 60-70℃后再进行洗脱，则可增加更大片段（> 10 kb）DNA 的产量。
Note：如果试验需要，可使用 TE 缓冲液 (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0)
- 若环境温度较低（如 4℃或－20℃），溶液可能会形成沉淀，此时不可直接使用。可将其置于37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后，使用前需恢复至室温。因此，溶液的运输和储存均应在室温（15℃-25℃）下进行。
- 本产品自售出之日起提供一年质量保证。所有试剂均通过严格质量检测，确保性能稳定可靠。
- 本产品仅供专业研究人员在受控环境下使用。操作人员须佩戴防护手套及护目装置等个人防护装备，并严格遵守所在机构的安全操作规程。请注意，部分试剂可能具有刺激性，使用时需特别谨慎。
- 避免试剂长时间暴露于空气中，以防挥发、氧化或 pH 值变化，使用后请立即盖紧瓶盖，并按照说明书要求妥善储存。
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申请记录
文献和实验Amicon Ultra-0.5 mL Centrifugal Filters for DNA Purification and Concentration 操作示意图： With their vertical membrane design, Amicon Ultra 0.5 mL filters deliver great performance and lower spin times
刚才收集到的上层液，重复步骤4。 6) 加入200 ml chloroform萃取上层液，并重复步骤4。 浓缩质体DNA 1.仪器用具： a.桌上型离心机 b.真空干燥器 2.药品及试剂： a.3 M sodium acetate (NaOAc), pH 5.2 b.100% ethanol c.TE buffer 3.方法步骤: 1)加入1/10体积的sodium acetate于DNA溶液中，使其最终浓度为0.3 M
目的 将复杂的细胞分子混合物加入有机溶媒，除去蛋白质及其它成分，就可以纯化DNA。一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白质变性(denaturaion)的特性来进行萃取的步骤，DNA和RNA不溶于有机溶媒中，而溶于水层。另外，分子选殖(molecular cloning)常利用洋菜胶(agarose)来分离不同大小的DNA片段或用以纯化DNA。 DNA经限制酶反应、自胶体中溶离或任何酵素反应后，常常体积遽增，为了浓缩已经纯化的DNA，常利用酒精沉淀法来制备，经过离心
