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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
TBST buffer
- 供应商:
天津本生生物
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文献和实验使用 3~5 次。 转移缓冲液 1X 电转液: 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解,冰醋酸调 pH 至 7.2,定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ,1 mL 吐温 20,混匀后即可使用,最好现用现配。 封闭液(含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液) 溶解后使用,一次性使用。 RIPA(中)裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS
(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
修复液1×工作液浸没。2)将修复杯置于微波炉内高火煮沸。3)低火维持15min。4)取出室温自然冷却至室温。3.封闭:1)去除玻片上残存洗液。2)用组画笔圈出玻片上的样本区域,滴加封闭剂,覆盖样本区域。3)室温保湿震荡10min。4.一抗孵育:1)去除玻片上的封闭剂。2)用移液器滴加稀释的一抗溶液,浸没样本区域。3) 37℃恒温保湿震荡孵育1hr。4)用1×TBST buffer浸洗玻片3min,重复1次。5.二抗孵育:1)去除玻片上残存的洗液。2)直接滴加二抗溶液,浸没样本区域。3)室温保湿震荡孵育
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