- ￥2466
- 博尔森生物
- BES2161PCR
- 中国/上海
- 2025年07月15日
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- 技术资料
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999
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
48T 非一管式/48T 0.2PCR管
| 规格： | 48T 非一管式 | 产品价格： | ￥2466.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 48T 0.2PCR管 | 产品价格： | ￥2466.0 |
羊源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法GB标准）
产品说明物种鉴定系列可针对食品、饲料等样品中动物源性成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线
判定结果。本产品用于羊源性成分的检测，检出限为 0.1%。
产品组成（48 测试）
适用仪器
ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。
自备耗材和仪器
①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。
注意事项
1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
1）第一区：试剂准备区。
2）第二区：样本制备区。
3）第三区：扩增及产物分析区。
★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
样品处理
参照《GB/T 38164-2019 常见畜禽动物源性成分检测方法 实时荧光 PCR 法》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。
样品的采集和制备是动物源性鉴别的重要步骤，为防止交叉污染，应使用一次性消耗品，研钵应经 160℃干烤2 h，其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次氯酸na溶液浸泡。
取样应尽量采取肌肉组织，对于同一批样品，应多点采集合并后，作为一份样品进行均质，提取 DNA。
采样过程应快速完成，将采取的样品迅速放入组织搅碎机中进行均质成糜状，充分混匀，取 0.1 g 充分混匀的样品，采用液氮研磨或均质器均质。
详细步骤请按照标准操作。
实验操作
1. 试剂配制（试剂准备区，放置于冰盒中进行）：
若有 N 个待检样品，则参照下表，按照 N+2 个数量计算各组分用量（N 个待检样品+1 个空白对照 NG+1 个阳性对照 PG），涡旋混匀，离心 30 秒，分装于 0.2ml PCR 管中。
2.模板制备（样本制备区）
建议使用动物组织基因组 DNA 提取试剂盒等商品化试剂盒，具体过程详见产品说明书。
3.添加模板（样本制备区，放置于冰盒上进行）
向步骤 1 每管反应液中分别加入 5μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-羊源-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀 30s，离心 1min，立即进行 PCR 扩增反应。
4.扩增反应（扩增及产物分析区）
使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM（山羊）和 VIC（绵羊），淬灭基团选择 NONE（山羊）和 MGB（绵羊）。按下列条件设置扩增反应：
5.基线和阈值设定
基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过空白对照扩增曲线的最高点。
结果判定
检测样品 FAM 与 VIC 通道均 Ct≥40，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线，可报告样品阴性，不含有羊源性成分或含量低于检测限；
检测样品 FAM 或 VIC 通道 Ct≤35，曲线呈“S”型扩增曲线，可直接报告样品阳性，含有羊源性成分；检测样品 FAM 与 VIC 通道均 35＜Ct＜40，需进行一次重复实验，若 FAM 与 VIC 通道均 Ct 值≥40 则为阴性，不含有羊源性成分或含量低于检测限；否则为阳性，含有羊源性成分。
NG 反应管结果显示“阴性”，PG 反应管结果显示“阳性”，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。
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羊源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法GB标准）
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