- ￥2800
- YLKBIO
- YLK-PCR0006
- 国产
- 2026年01月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Encephalitis Virus B RT-PCR Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 规格：
50T
| 产品及特点 | 乙型脑炎病毒(Encephalitis Virus B)是流行性乙型脑炎的病原体，在低温条件下，该病毒能自下而上较长时间，在动物、鸡胚及组织培养细胞中均能增殖。幼猪是乙脑病毒的主要传染源和中间宿主，蚊子是乙脑病毒的传播媒介。当人受带病毒的蚊子叮咬后，乙脑病毒进入人体，在血管内皮细胞、淋巴结、肝、脾等吞噬细胞内增殖，并经血液循环到达脑部而引起炎症，因此快速灵敏诊断具有重要意义。为此本公司开发了本产品，可用于在科研领域快速定量检测乙型脑炎病毒。它具有下列特点。它具有下列特点：
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| 规格及成分 | 成 份 | 十孔盒包装 | |||
| 5×双酶一管式 RT-PCR Buffer | 200 μL（黄盖） | ||||
| MMLV-Taq Mix | 75 μL（红盖） | ||||
| 超纯水 | 1 mL（本色盖） | ||||
| 乙型脑炎病毒 RT-PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） | ||||
| 乙型脑炎病毒 RT-PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） |
50 μL（黄盖） | ||||
| 核酸释放剂试用装 | 20 次（1mL,绿盖） | ||||
| 使用手册 | 1 份 | ||||
| 注：为避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供乙型脑炎病毒专一的 DNA 片段作为阳性对照。 | |||||
| 运输及保存 | 低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。 | ||||
| 自备试剂 | 样品 RNA |
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| 使用方法 | 一、样品 RNA 的制备 1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性 |
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- 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次核酸释放剂试用装。
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- 上机进行 RT-PCR，RT-PCR 反应参数为:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 42℃ | 30 分钟 |
| 预变性 | 95℃ | 5 分钟 |
| PCR 反应 （40 个循环） |
93℃ | 45 秒 |
| 55℃ | 120 秒 | |
| 延伸 | 72℃ | 5 分钟 |
- 琼脂糖电泳检测扩增效果，阳性样品预期得到的扩增产物长度为 270bp。如
| 果阴性对照有此扩增产物或阳性对照无此扩增产物，则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有此扩增产物、阳性对照有此扩增产物的情况下，才有必要分析样品的实验结果，如果有此扩增产物则为阳性， 如果无则为阴性。 |
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| 关联产品 | 乙型脑炎病毒可视化 RT-LAMP 检测试剂盒 |
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文献和实验。 【产品研发意义】 埃博拉出血热(EHF)是由埃博拉病毒(Ebola virus，EBOV)引起的一种急性出血性传染病，发病率快，致死率高，是人类危害最严重的传染病之一，对公共卫生安全和人类的健康有很大的威胁。 到目前为止，EHF还没有有效治疗的药物和疫苗。我国尚未有检测到EBOV病毒，为了防止EBOV进入我国，建立一种快速、准确、敏感的检测方法显得尤为重要。为此，我公司研制出埃博拉病毒Z亚型核酸荧光PCR检测试剂盒、埃博拉病毒Z、S亚型双重核酸荧光PCR检测试剂盒和埃博拉病毒Z、S、B、C、R
碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物，37℃，2h；e、缓冲液洗涤5min，3次；f、NBT、BCIP暗处显色，镜下控制，终止显色；g、常规脱水：透明、封固。2、原位RT-PCR步骤（1）预处理：a、蛋白酶K（0.3mg/mL） 54℃消化20min，蒸馏水洗；b、95℃加热3min，灭活残存的蛋白酶。（2）原位扩增：a、在有RNA酶抑制剂存在的条件下，用随机六聚物进行逆转录反应；b、用热启动法进行PCR扩增。标本加热至75℃时加上反应液，覆以盖玻片，四周用指甲油密封。然后将温度升至95℃，2min。再将热循环
原位聚合酶链式反应（in situ PCR）和原位反转录聚合酶链式反应（in situ RT-PCR）操作规程
5min ， 42 ℃杂交过夜。 （ 2 ）杂交后用 2×SSC 洗涤 10min ， 3 次， 1×SSC 洗涤 10min ， 3 次； （ 3 ）缓冲液洗涤 10min ， 3 次； （ 4 ）加碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物， 37 ℃， 2h ； （ 5 ）缓冲液洗涤 5min ， 3 次； （ 6 ） NBT 、 BCIP 暗处显色，镜下控制，终止显色。 （ 7 ）常规脱水：透明、封固。 2 、原位 RT-PCR 步骤
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