- ￥2800
- YLKBIO
- YLK-PCR0003
- 国产
- 2025年11月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
WSSV PCR Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 规格：
50T
白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus, WSSV)能感染近海多种甲壳类生物，是对虾病毒病的最重要病原。感染 WSSV 5~7 天，对虾死亡率高达 100%。因此，研发一种快速简单、准确、实用高效的 WSSV 检测方法具有重要的社会意义。本产品即是基于PCR法的白斑综合症病毒快速检测试剂盒。本试剂盒具有下列特点它具有下列特点：
- 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。
- 引物经过精心优化，专一性强，只扩增 WSSV，不跟其他病毒发生交叉反应。
- 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
- PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
- 本试剂盒足够做 40μL 体系的PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（亮黄盖） |
| 超纯水 | 1 mL（蓝色） |
| WSSV PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| WSSV PCR 阳性对照 | 100 μL（黄盖） |
| DNA 病毒裂解液（试用装） | 9 mL |
| 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。WSSV PCR 阳性对照需要单独放置，
不要污染其他试剂。
自备试剂：样品 DNA。
使用方法：一、样品 DNA 的制备
- 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒
DNAout），其使用手册可以向本公司客服索取。
- 如果要制备 N 个样品，则需要做 N+2 个样品制备，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在 200μL 水中加10μL WSSV PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液作为阳性对照，样品制备阴性对照是直接用 200μL 水。提取结束后最后得到 200μL 模板 DNA（每个样品）放冰上待用，溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL，否则PCR抑制物很可能会抑制 PCR。
- 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阴性对照（用水）和一个PCR 阳性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
4.按下表设置 PCR 反应：
三、电泳检测
- 取 10-20 μL PCR 产物。2%琼脂糖电泳检测 PCR 产物。本产品提供的PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 143bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验要：根据基因库中的口蹄疫病毒（FMDV），猪水疱病病毒（SVDV）和水疱性口炎病毒（VSV）各基因序列，设计了与FMDV，SVDV和VSV互补的3对特异性引物，对样品中的cDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化，结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带，分别为189 bp，125 bp和300 bp。用这3对引物对病毒样品cDNA模板进行多次扩增，均能稳定得到与设计相符合的3条特异性条带。本试验能特异、敏感、快速地鉴定FMDV，SVDV和VSV。 关键词：口蹄疫病毒；猪水疱病病毒；水疱性口炎
慢病毒（Lentiviral，LV）可将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而实现持久性表达，这一特性使其在科研与临床治疗（CART）中大放异彩。 但在临床治疗中，外源基因的整合会带来插入突变的风险。这种情形下，研究者开始拓展非整合慢病毒的可能性。 IDLV(Integration-deficient Lentiviral) 即整合缺陷型慢病毒，是通过在慢病毒整合酶中引入突变产生的非整合型慢病毒，「不整合」的特性使其更适合于静息细胞、临床治疗、干细胞研究等场景使用。 与其他载体相比，其优势
buffer，摸索镁离子浓度或适当加入 DMSO（小于 0.3%） · 提高退火温度，增加延伸时间（反应条件参照试剂盒说明书） 问题 2：假阳性 现象：空白对照出现条带 可能原因： · 引物设计不适，与目的序列具有同源性 · 试剂污染：水、移液枪等被核酸污染 · 样品间出现交叉污染 解决方法： · 实验仪器高压灭菌 · 实验试剂（酶除外）高压灭菌，离心管枪头一次性使用 · 规范实验操作 · 假阳性可通过巢式 PCR 解决，或者使用特异性较高的试剂盒扩增 问题 3：拖尾、弥散 现象：电泳出现拖尾、涂抹
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