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文献和实验【求助】7000bp左右的片段,用PCR的方法怎么样可以获得?
hanrui1009 小女子是新手,最近忙于做一个抗病基因的克隆,基因的片段大小7010bp左右,打算采用PCR的方法克隆,Taq LA polymerse和29bp的特异性引物,扩增不出来,请高手指点啊! zjubell 扩不出来太正常了。可能你的模板根本就没有,或者降解,或者表达很低。 另一方面,这么长,聚合酶可能在中途就掉下来了。 建议你分段扩增。比如分成5-10个PCR,每段扩600-800bp,设计
Purification and Functional Characterization of C4b-Binding Protein (C4BP)
C4b-binding protein (C4BP) is a soluble, 570 kDa large glycoprotein, present in plasma at a concentration of approximately 200 mg/L. C4BP is the main inhibitor of the classical and lectin pathways of complement, where it controls C4b-mediated
shRNA的RNAi效果,但是加长shRNA对于RNAi效率已达90%的19bp shRNA没有帮助。该论文中还比较了各种长度LOOP(3~9)的RNAi效果,结果提示某些较长LOOP会抑制RNAi效果, shRNA质粒中sense链在前还是antisense链在前,与RNAi效果无关,只要其中有与靶基因mRNA互补的片段即可(Paddison PJ, et al. Genes Dev. 2002 Apr 15;16(8):948-58)。
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