小肠粘膜上皮细胞_兔原代细胞

正常大兔胆囊上皮细胞的培养

实验材料： 1.  2—3月龄的家兔胆囊； 2.  不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3.  培养用液：以DMEM/F12为基础培养基，添加10%的胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、2μg/ml胰岛素、10 ng/ml表皮生长因子以及100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。酶消化液为0.125%Ⅳ型胶原酶溶液。组织清洗液为DMEM培养液，并添加200 IU

正常兔食管上皮细胞培养

实验材料： 1. 大兔的正常食管组织 2. 6孔培养板：用多聚赖氨酸4℃包被过夜 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.4 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊 实验方法： 1. 处死大兔，取正常食管组织放入含双抗的PBS（pH=7.2）中反复清洗3次，以洗去组织表面

兔晶状体上皮细胞培养方法和体会

片而不使囊膜片漂浮,每周换液2次。晶体上皮细胞在接种3天后,在倒置显微镜下可见,植块边缘有新生的细胞爬出,细胞呈规则六边形,大小均匀,胞质透明。一周后可融合成小片细胞。二周后可长满融合成单层细胞。细胞多为类圆形、多角形。2、传代培养：细胞铺满瓶底或生长到一定密度时,用0.25%胰蛋白酶消化,1∶2传代培养。传代时在培养瓶或培养皿底放置适当大小的盖玻片,细胞生长其上,便于光镜及免疫组化观察。细胞一般24h内贴壁,约3～4d细胞可达融合,融合的细胞和原代相似,大小基本一致。传代超过4～6代时,细胞的增长