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- 技术资料
- 品系:
绵羊卵巢颗粒细胞
- 细胞类型:
绵羊卵巢颗粒细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
Sheep ovary granulosa cells
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
绵羊卵巢颗粒细胞
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
绵羊卵巢颗粒细胞
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
绵羊卵巢颗粒细胞
- 规格:
5*10^5
卵巢是雌性动物的生殖器官。卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。
卵巢是分泌雌激素的主要器官。卵巢分泌的雌激素主要是雌二醇。卵巢中颗粒细胞是合成雌激素的场所。其产生过程是使雄烯二酮转变成雌激素:内膜细胞在LH的作用下,使胆固醇转变为雄烯二酮;颗粒细胞在FSH的作用,发育过程中产生芳香化酶,它使雄烯二酮转变成雌激素。形成的雌激素分泌到卵泡液和血液中。
细胞英文名称:Sheep ovary granulosa cells
形态特性:不规则细胞
生长特性:贴壁培养
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常卵巢组织。
2) 细胞鉴定:卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:不规则细胞,贴壁培养。



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


运输和保存:干冰运输及复苏好存活细胞:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
绵羊卵巢颗粒细胞收到后处理(仅供参考,具体详询说明书):
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)半贴细胞和贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
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文献和实验大鼠颗粒细胞的分离方法一:分离23天的SD大鼠,皮下注射DES(2.5 mg/只),连续三天。于最后一次注射24 h后,颈椎脱臼处死动物。无菌收集两侧的卵巢,置于盛有PBS的EP管中清洗。将PBS清洗的卵巢放在盛有培养基的平皿中,在体视显微镜下,用25号针头刺破卵泡,释放出颗粒细胞。后吸取平皿中的细胞悬液,镜下计数,接种细胞。培养基(McCoy's 5A Medium),加谷氨酰氨,用碳酸氢钠调节PH值为7.2。参考文献:1.Down-Regulation of Steroidogenic
管。 卵泡的发育、成熟与退化 编辑本段 回目录 卵泡是卵巢的基本功能单位。 (一)卵泡的发育 进入将分化为卵巢的生殖细胞称为卵原细胞(Oogonia),先发育为卵母细胞,然后发展为始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡、最后达高度分化的排卵前有卵泡腔的卵泡(graafian follicles)。 在妊6~7周时卵原细胞通过有丝分裂大量增殖,至妊8周时开始进入第一次减数分裂,由一层颗粒细胞围绕卵母细胞成为初级卵母
1.实验动物 产蛋期母鸡(动物实验中心购买),普通饲料喂养,自由进食进饮;实验前禁食12h 2.主要试剂及仪器 EDTA-2Na购自国药集团化学试剂有限公司;双抗购自Hyclone公司;M199培养基、胎牛血清及Ⅱ型胶原酶均购自美国Gibico 公司;CO2恒温培养箱购自美国Thermo公司 3.实验步骤 A. 翅下静脉注射2mL EDTA-2Na(W/V,2%)溶液处死母鸡,新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min,打开腹腔,剪取整个卵巢,小心剥离卵泡(以8-15g为最佳),置于装有PBS











