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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
羊肺成纤维细胞
- 细胞类型:
羊肺成纤维细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
Sheep Lung Fibroblasts Cells
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
羊肺成纤维细胞
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
羊肺成纤维细胞
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
羊肺成纤维细胞
- 规格:
5*10^5
成纤维细胞是肺间质中含量最丰富的细胞种类。这些成纤维细胞与普通的相似,但也有其特有的特征,例如具有很长的伪足和细胞间的间隙连接。
肺成纤维细胞的主要功能为分泌肺泡隔基质中的III型胶原,弹性蛋白以及蛋白多糖,也在肺部受损时担任重要的修复和重建功能。肺部受伤后,在炎症部位的一定程度的成纤维细胞积聚是肺部复原的关键步骤,过多或者不足的成纤维细胞聚集都会导致肺功能异常。
细胞中文名称:羊肺成纤维细胞
细胞英文名称:Sheep Lung Fibroblasts Cells
形态特性:长梭形细胞,不规则细胞
生长特性:贴壁培养
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常肺组织。
2) 细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。


1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养
羊肺成纤维细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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细粒棘球绦虫 Echinococcus granulosus
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差速贴壁法纯化一次,即待细胞贴壁1.0-1.5 h后(即绝大多数成纤维细胞都已经贴壁),弃去未贴壁的细胞和培养液,更换新的培养液。 3 结果 成纤维细胞为长梭形形态,常呈漩涡状生长。 4 讨论 一般来说,贴块培养法,只要不加一些选择性的添加物(血清浓度 10%,不加生长因子,不加肝素,不加地塞米松等),最后成纤维细胞必然成为优势细胞,因为:巨噬细胞是终末细胞;内皮细胞较娇气;平滑肌细胞贴壁慢,也不容易爬出;肺上皮细胞会被血清抑制,增殖能力也很弱











