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NK细胞

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    • 品系

      NK细胞

    • 细胞类型

      NK细胞

    • 肿瘤类型

      /

    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 库存

      100

    • 英文名

      NK Cells

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 年限

      永久

    • 运输方式

      快递形式

    • 器官来源

      NK细胞

    • 是否是肿瘤细胞

      /

    • 细胞形态

      正常

    • 免疫类型

      /

    • 物种来源

      NK细胞

    • 相关疾病

      /

    • 组织来源

      NK细胞

    • 规格

      5*10^5

    NK细胞
     

    自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
    自然杀伤细胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 对NK细胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素(leukoregulin,LR) 对NK细胞的活化和分化有正调节作用, 体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。前列腺素 (PG)E1、E2、D2和肾上腺皮质激素等对NK细胞的活性有抑制作用。

     

    细胞中文名称:NK细胞

    细胞英文名称:NK Cells

    形态特性:

    生长特性:悬浮培养

     

    细胞特性
    1)细胞来源于外周血。
    2)细胞鉴定:CD56或CD16免疫荧光染色为阳性。
    3)经鉴定细胞纯度高于90%。
    4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
    5)细胞生长方式:悬浮培养。


    产品细节图片1

    产品细节图片2产品细节图片3产品细节图片4

    1、 细胞传代:
    1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
    2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
    液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
    3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
    培养箱中培养;

    2、 细胞冻存:
    1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
    2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
    止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
    3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
    4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
    降温盒可直接放入-80℃。

    3、细胞复苏:
    1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
    晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
    2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
    3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养



    NK细胞收到后处理

    细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。

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    图标技术资料

    资料下载:

    细胞培养步骤.docx 附 (下载 0 次)

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