相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
人肺癌细胞带绿色荧光 A549/GFP
- 细胞类型:
人肺癌细胞带绿色荧光 A549/GFP
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
A549/GFP
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
人肺癌细胞带绿色荧光 A549/GFP
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
人肺癌细胞带绿色荧光 A549/GFP
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
人肺癌细胞带绿色荧光 A549/GFP
- 规格:
T25培养瓶
| 细胞英文名称 | A549/GFP | 细胞中文名称 | 人肺癌细胞带绿色荧光 |
| 形态特性 | 上皮细胞 | 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养体系 | 1640+10%FBS | ||
| 传代方法 | 1:2传代 | 传代情况 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
| 备注 | 悬浮细胞离心收集 | ||
STR:



1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


人肺癌细胞带绿色荧光 A549/GFP收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验孔培养体积缩小为 384 孔和 1536 孔形式的建议体积。由于接种体积和密度可能因细胞类型和下游应用而异,因此建议针对检测方案优化条件。 方法和材料 实验可以是贴壁生长癌细胞系的肿瘤干细胞,亦可是McCoy's 5a 培养基中培养的 T-29 人结肠癌细胞、F-12K (Kaighn's Mod.) 培养基中培养的 A549 人肺癌细胞,MCF7 人乳腺癌细胞。 另外,HTB-22™ 和 DU 145 人前列腺癌细胞均在杜氏改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中培养。所有生长培养基均含有
个基因克隆到表达株(原核,真核)去表达,那么走的是蛋白的外源表达及体外活性(功能)检测。 如果这80个基因分别克隆到肿瘤干细胞和非肿瘤干细胞中去,通过tag(或其他辅助蛋白如GFP等)检测其表达差异,那么其结果就不是“80个已知其序列的基因在肺癌细胞系的肿瘤干细胞和非肿瘤干细胞中的表达差异”,而变成了“80个基因在肺癌细胞系的肿瘤干细胞克隆株和非肿瘤干细胞克隆株中的表达差异”。 所以检测80个已知其序列的基因在肺癌细胞系的肿瘤干细胞和非肿瘤干细胞中的表达差异,就需要这80
在一起通过仪器,与单个细胞相比,测量高度不变,宽度和面积变为两倍,即出现 FSC-Height 不变,FSC-Area 和 Width 增大的现象,如图所示: 分析数据时,如果没有排除粘连体,就可能对结果的判断造成误导。举个例子: 如果样本中一部分细胞带有 GFP 绿色荧光,一部分细胞不带荧光,需要分选出带有 GFP 信号的细胞,细胞在缓冲液中的状态,可能会出现以下 5 种情况: 单细胞 粘连体 一个带 GFP 和一个不带 GFP 的细胞形成的粘连体(红框),在没有被排除的情况下,会被默











