维持培养基

维持培养基之糖：

使用半乳糖作碳源D+ Galactose（常用培养基都是Glucose，以阻止培养基中乳酸形成，少量溶解的CO2由bingtong酸代谢产生。这一培养基的优点是明显的，特别是在保持较高CO2有困难时) 该成份是我司在开发维持培养基中一种成份，细胞系常用配套L15，结合在该类细胞培养特点，维持目的结合以下应用，让后期超量细胞尽可能达到预期实验设计（调节超量培养中二氧化碳代谢）。

该类培养基已用来成功的培养了外周神经元，但尚未在CNS神经元的发育研究中全面检测过。
综上该类培养基用于原代培养一个不错的方案。
国内有考虑用这种培养基建系实验室相关问题可讨论，简单参数阐述相关参考比较
常用于Mammary gland cell培养基中D+ Galactose   Concentration (mg/L)  900.0  mM  5.0
常用DMEMD -Glucose (Dextrose)Concentration (mg/L)    4500.0    mM  25.0
常用RPMI 1640-Glucose (Dextrose)    Concentration (mg/L) 2000.0   mM 11.111111
常用MEM-Glucose (Dextrose) Concentration (mg/L) 1000.0   mM  5.5555553
便于记忆了解，从糖成分看培养基发展史，成倍关系。
相关研发培养目的文献中思路参考文献：
1. Chinchar, G.D. and Sinclair, J.H. (1978) J. Cell. Physiol. 96:333 (amphibian, frog, ICR, 2A).
2. Leibovitz, A. (1963) Am. J. Hygiene 78:173.
3. Middlebrooks, B.L., Mak, P.C. and Ellender, R.D. (1980) Proc. Soc. Exper. Biol. Med., 165:123 (fish fibroblast).
--列出都是较早文献目的是开发人员碰到相关难题更深入了解发明者的思路，发明想法，开拓解决思路，细工在统计问题解决问题过程中受益匪浅。相关介绍我们又对细胞系中难养细胞有一整套思路，后面碰到该类问题，都可告知讨论，我们给出参考建议。

维持培养基之应用

一次性固定床生物反应器
最大4m2培养表面积,占地面积小，高达500m2表面积，相当于3,000只细胞培养转瓶（每只1700cm2）,相当于790个10层细胞工厂.

多层板生物反应器——贴壁细胞种子培养
碟片高度紧密排列，占地面积小（高度仅0.8m），可提供与20个10层细胞工厂（高度约4m）相当的培养表面积，节省80%空间.


传统培养含血清方案前沿超量培养介绍-
特点优势：细胞骨架无变化，后续相关实验生产可行性稳。
结合我司六年统计积累开发相关试剂，技术储备，解决超量培养中问题更稳妥。


有需要产品资料，应用（AAV，糖尿病案例）相关介绍的留邮箱，北京有了解相关产品的实验室，我们随时可以过去介绍。
产品还比较新，灌流上清因子研究，蛋白抗体生产、晶体研究，诊断试剂原料生产类用户，可讨论相关应用中遇到的问题。
根据实验或生产目的不同，其他成分组加减案例已有溶瘤，抗原抗体生产用户应用，要是能较深度理解该成分目的，后续其他实验生产中作为解决难题痛点至关重要。各组织部位来源不同，培养中要点与特点也是有些差别，不管哪种应用，细胞质量更好些，对后续试验相当重要，转染效率，冻存复苏这些比较后试验能看到差别，为后续实验目的达到理想效果做些有益的推进，我们在腺病毒工业应用中也是得到用户满意的肯定。

维持培养基之氨基酸稍后介绍，维持培养基在原代培养，蛋白高产细胞生产阶段高质量细胞状态起到叫关键作用，在无血清较难维持情况下的一种解决办法思路推荐。细胞缓冲能力强，给下游生产带来很多容错条件。结合超量培养给原代细胞蛋白因子分泌生产实现做好最基础的技术储备。

超量培养应用-相关
IL-1α，IL-1β    IL-2    IL-3    IL-4    IL-5    IL-6    IL-7    IL-8/CXCL8    IL-9    IL-10    IL-11    IL-12    IL-13    IL-15    IL-16    IL-17    IL-17A    IL-17F    IL-18    IL-19    IL-20    IL-21    IL-22    IL-23    IL-24    IL-25    IL-26    IL-27    IL-28    IL-29    IL-30    IL-31    IL-32    IL-33    IL-34    IL-35    IL-36α、IL-36β、IL-36γ    IL-37    IL-38    GM-CSF    G-CSF    M-CSF    SLF    TNF（TNFα）    淋巴毒素（TNFβ）    IFNα    IFNβ    IFNγ    TGFβ    LIF    Eta-1    Oncostatin M
类器官、外泌体、外囊泡、溶瘤、自细胞蛋白高产、自动化培养中试剂优化，稀有因子相关需求，前期预实验建议实验室培养级别验证，细胞工厂中试，在到超量培养比较可行，研发成本低，无前沿技术限制，有细胞培养经验国内实验室及人员众多，最基础的技术储备统计较关键。相关试剂开发已有五年，关键步骤中所用试剂：细胞消化，促贴壁（锚着），规模转染，血替、可参考我司相关产品（可与任意进口品牌评测验证比较），国产培养体系，进口培养体系并行。可行性稳妥。

20220401: 上清研究用户，建议多测几个来源的细胞，能研发合作的实验室，提前报备，我们可提供细胞上清。对国内实验室比较熟悉，培养条件保种理念是我司一直推荐的培养方案，上游研发用细胞质量也很关键，可讨论评价实验参数结果为准。例如案例细胞，293，hela来源不同，细胞培养特点，生长特性都有些差别，具体问题具体讨论。


20220411：杯状细胞培养用户可来信标注（涉及热门类器官，可不全是类器官），这类培养涉及原代较多，国内建系还不是很普遍成熟，可从国内专利层面互相讨论后续培养可行性，实验思路推荐国内正规库已建好的系（虽然不会很顺利）在这个基础上少走些弯路（国内库已有相当多年的技术经验储备），或者先用成熟细胞系验证后在做原代，原代涉及层面较多，细工一直在做相关真正国产体系生产试剂开发，相关难点统计。生产方面试运营（这类产品开发不是一年两年就可拿出产品的），国内有细胞类生产型单位如有兴趣找国内生产型备份，可来信告知。

20220525:

开发合作：培养基生产相关数据库及相关开发合作，因生产涉及各类成份较多，标准较多，我司准备做些全部国产技术生产的培养基，因平时销售过程中涉及细胞培养中的问题统计为主，准备做些国产原料运作及生产，这类产品不是很快就能生产出来的，需要大量实验数据支撑。若有兴趣与资源的老师，可讨论下。合作要求最重要需国内全资公司，不涉及外资的公司(周期长，费用高，出成绩很慢，欢迎统计高手加盟）
统计中：
各组织自体与离体后PH变化开始统计（已有相关部分数据），离体后完全培养基PH变化可行性有用户做过相关可标注，我们以国内正规库建系、二倍体类、正常组织细胞系细胞经验入手，已有部分资料，在正常组织细胞系上工程应用已有几个案例，增强铁壁试剂连接已有介绍。
各组织线粒体数量与成熟细胞系培养中经验结合摸索中，目前重点集中在，肝、乳腺、胰岛胰腺、免疫悬浮细胞。这几个先开始统计。

人才储备：细胞工程培养相关公司，如需那类人才储备，可把要求发我。我们可按您要求推荐。我司目前方向是超量培养相关试剂开发。对该类人才一直在做相关统计。

20240926

冗余研发路径，对国内常规培养体系了解并深刻理解，就是难点痛点都要试错，通过试错并统计找到可能解决问题的路径。
经历历程：难养类细胞问题统计，黑点，生长慢，成瘤不稳定细胞问题统计，冻存复苏细胞活率统计，难转细胞特性，转染试剂研发方向，简易单克隆建系中优势等，都是为国内建系做足技术储备。
例如：
就转染后死细胞过多，细工在培养基，血清方面做些技术储备。
转染后的细胞对培养基PH要求更高，我们生产专门对该项指标做严格控制，可做预实验比较，如果能达到满意预期效果，这个培养基在救助死细胞过程中起到关键作用，也为自动化应用提前做相关技术储备。
该问题来源：二倍体系（WI-38，MRC-5,原代问题常年统计，工业应用中二倍体培养体系普通实验室较难达标，常规系容错能力很高，长期培养后，也会形成培养室自身特点。建议实验室库有纯国产培养体系备份，并长期验证。
血清：种子库级别试剂，我们平时验证对标国内正规库来源细胞长期验证，特别是较难养的（各类难养的乳腺，肝，胰岛胰腺，免疫类系长期验证），转染后死细胞过多方法，建议按原指标血清用量提升5%，更多营养补充，救助转染过程中损伤救助。
耗材：以上验证尽量用进口耗材，难养系分类较多，各有各的特性细节都可讨论沟通，建议给出原始细胞图片，现细胞图片，培养体系厂家，货号。都会得到细工全套免费试用小包装验证。
就自动化培养，转染，细工简易单克隆方法可共享potocol,及后面问题可讨论，讨论前细胞生长特性，准确的目的需求要沟通。

20250218

常规培养基钙相关统计-细工生物通用培养基ECAK-5钙含量90

通用培养基验证（含血清）：建议用最难养细胞或系验证，这个条件可覆盖简单细胞培养，因该产品是2025年初推出，用户使用熟悉时间还不够，考虑后面会用到通用型培养基用户，建议用户用自己熟悉的细胞，难养系等，经过种子库反复冻存完全没问题验证，细工黑点、生长慢、接种成瘤不稳定，转染难细胞，原代首代癌培养，建议用我司相关potocol验证（黑点去除，简易单克隆），验证前，试剂厂家货号，培养中问题，增值情况等，都可提前讨论沟通。

细胞深度维持培养实验，自动化培养，微流控制培养、高通量药筛，基因组挖掘、定向发现、机制解析、通路精细调控、网络解析、内吞机制、抑制剂的研究、微量药物及其代谢物的分离、药物在生物体内的吸收、分布、生物转化和排泄等过程的特点和规律、定量药理学、过程中先导药物药代特性筛选和评价、内源活性代谢物、细胞超长维持培养是我们优势在以上研究中有特殊要求用户可详细讨论无文献，无方法、国内试剂生产商提前试剂方法技术储备。

检验科，病理科，IVD研发企业-长期统计合作内容：血液,尿液临床检测项，提取物能否用作细胞培养，如可以能否用下您的potocol。细胞培养应用建系目的，样本重点项，无菌，尽量无化学成份，机械力干扰给些建议也可以。钙化关系统计项：血管钙化、肺钙化、动脉钙化、乳腺钙化、甲状腺钙化、、前列腺钙化、心脏瓣膜钙化、海默、统计整体目的思路：正常组织，钙化组织，炎症组织（巨噬）、癌症组织。给癌建系统计些首代离体后建系关键参数与备份方案为主。

计算机辅助-自动化培养冗余试剂，通用方案医疗解读系统赋能检验医学智慧化，探索尝试上述临床实验室有相关建系目的，临床质普研发，药物设计，筛选优化，辅助药物设计，遗传疾病，病理初筛。基因组数据分析AI低代码，核心标准化，信息低代码个性流程搭建 化合物空间搜索算法。

讨论：临床生化，免疫检测，质谱检测提取物建系辅助，汇总并应用，细工能力只能在传统细胞系上做统计并技术储备，有需要合作临床实验室可合作。