4-氨基-6-苯基嘧啶,4-Amino-6-phenylpy

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法

也被用来突破目前蛋白质合理设计的界限 [ 15， 16] 。 1.1 末端截切 由于蛋白质不同，其末端区域对于结构和功能完整性的贡献也有所不同。对有些蛋白质来说，剪切掉末端部分氨基酸并不影响其三维结构和构造稳定性。在这些结构中，其末端部分经常未被定义或是呈无规则卷曲状态。然而，另一些蛋白质对其末端缺失非常敏感。在这种情况下，其末端少数几个氨基酸的缺失就会导致其构象稳定性 极大地降低，从而形成松散结构 [17] ，使其对蛋白酶更加敏感或是更易聚集形成沉淀 [18] 。这种现象已分别在 RNA

甲醇酵母表达常用溶液及缓冲液的配制

除菌。10*D：（20%Dextrose 葡萄糖）保存期为1年。200g葡萄糖溶于1000ml水中，灭菌15min或过滤除菌。10*M：（5%Methanol 甲醇） 保存期为2个月。将5ml的甲醇与95ml水混匀，过滤除菌。10*GY：（10%Glycerol 甘油） 保存期为1年以上。将100ml甘油和900ml水混匀后，高压灭菌或过滤除菌。100*AA：（0.5% of each Amino Acid，各种氨基酸） 4℃保存 保存期为1年。分别将500mg的L-谷氨酸、L-蛋氨酸、L-

不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表达模式

码），作为是否患有某种疾病（如癌症）的指征[119-24] 。不过，此类工作争议很大，因为越来越多的证据表明，临床过程和分析化学及信号处理过程中未经控制的变异可能会使研究结果可信度大打折扣[12,25-29] 。在分析过程中所应用的低级的质谱设备缺乏精确性，分辨率不够高，再加上到目前为止仅阐明了少量的有争议的标记物的特征 [130-32]，使怀疑论更加膨胀。如果几个不同的实验室分别证明了这些看似差异明显的多肽具有相似的氨基酸序列，则可表明这一新技术确实具有潜在价值。然而到目前为止，此工作尚在进行中