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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- CAS号：
939805-30-8
- 规格：
5mg
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文献和实验，点第二行 Primer-Blast ↓注意为FASTA sequence，因此在第一行键入>ACTB（ACTB为目的基因名），然后回车，粘贴刚刚复制的序列将上图product size数字改成下图数字继续下拉菜单如上图选择上图intron inclusion后的勾勾，但如果勾选上得不到结果，就可以不选。以上两步都是为了防止DNA污染。其它都可以不改，然后点Get Primers需要运行几十秒，得到10对引物后进行选择，最好GC百分比在45%-55%之间，Tm在60℃左右。
qPCR引物设计，Primer3 Plus 和 Primerbank 都能搞定！
accession、NCBI protein accession、NCBI gene ID、primerbank ID、NCBI gene symbol 以及 keyword 六个选项进行搜索。以小鼠的 beta-actin 为例。1、首先，到 NCBI 上找出β-actin 的 gene ID，如图，选择 gene, 输入 beta-actin：点击右边的分类 musmusculus：结果就出来了，小鼠 beta-actin 的 NCBI gene ID 是 11461，而 actb 则是小鼠 beta
，其 gene symbol，也就是官方大名其实是叫 ACTB）；在 Species 中选择物种 human or mouse；For text 中填入想查基因的 gene symbol；之后，Submit；可以看到针对 GAPDH 的不同对引物，具体序列，长度，Tm 值以及在其 cDNA 上位置等一些列信息点击「Click here for cDNA and amplicon sequence」，可以得到这对引物扩增的片段序列及位置：红色标记为上下游引物，蓝色标记为引物之间的扩增序列：超级方便有木
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