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一氧hua氮Nitric oxide,NO含量测定试剂盒

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  • 2025年09月11日
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    • 英文名

      一氧hua氮Nitric oxide,NO含量测定试剂盒

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海酶联生物科技有限公司

    • 保存条件

      避光 , 低温保存

    • 规格

      50管/48样

    一氧hua氮Nitric oxide,NO含量测定试剂盒
    分光光度法 
    注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义:
    NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。

    测定原理:
    NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。

    自备实验用品及仪器
    天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。

    一氧化氮含量测定试剂盒

    试剂组成和配制:
    提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
    试剂一:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。
    试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加热震荡15min)
    样品处理:
    1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆。10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
    2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心15min,取上清置于冰上待测。
    3.体液和培养液等其它液态样品:直接测定。

    测定步骤和操作表:
    一氧化氮Nitric oxide,NO含量测定试剂盒
    一氧hua氮Nitric oxide,NO含量测定试剂盒
    NO含量计算:

    标准曲线回归方程为:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986 
    1、组织样品:
    (1)按样本质量计算
    NO含量(μmoL/g 鲜重)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3= 0.14×(ΔA +0.0103)÷W
    (2)按样本蛋白浓度计算
    NO含量(μmoL/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷(V样×Cpr)×10-3 = 0.14×(ΔA +0.0103)÷Cpr
    2、细胞:
    NO含量(μmol/104 cell)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)×10-3= 0.14×(ΔA +0.0103)÷细胞数量(万个)
    3、其他样品:
    NO含量(μmoL/L)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷V样= 140×(ΔA +0.0103)
    V反总:反应总体积,0.9mL;V样:反应中样品体积,0.4mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g;Cpr:蛋白浓度,mg/mL

    一氧化氮含量测定试剂盒
     

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