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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
65
- 英文名:
Enterobacter Sakazakii Chromogenic Plate
- 保质期:
三年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
250g-1000g
阪崎肠杆菌显色平板9cm
英文名称:Enterobacter Sakazakii Chromogenic Plate
用于阪崎杆菌的显色培养,阪崎杆菌显蓝色,其它肠杆菌显无色。
用法
称取本品 8.62g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸完全溶解,121℃ 高压灭菌 15min,冷至 50℃ 左右时,倾入无菌平皿。
原理
利用阪崎肠杆菌自身代谢产生的酶与相应显色底物反应使菌落显色,以区分目标菌与非目标菌。显色底物是由产色因子和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色因子使菌落显示一定颜色。
操作步骤
1、用接种环接种mLST-Vm肉汤或EE肉汤增菌液 10μL 划线或涂布于阪崎肠杆菌显色平板上;
2、倒置放入培养箱 36℃±1℃ 培养 22-26h,典型的阪崎肠杆菌为蓝-绿色菌落;
3、挑取典型菌落做生化试验。
| 伊红美蓝琼脂 (EMB) | |
| Eosin-Methylene Blue Agar | |
| 营养肉汤 (NB) | |
| Nutrient Broth | |
| 营养琼脂 (NA) | |
| Nutrient Agar | |
| 乳糖胆盐发酵培养基 | |
| Lactose Bile Broth | |
| 乳糖复发酵培养基 | |
| Lactose Broth | |
| 去氧胆酸盐琼脂 | |
| Desoxycholate Lactose Agar | |
| MR-VP培养基 | |
| Methyl Red Voges Proskauer Broth | |
| 结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA) | |
| Violet Red Bile Agar | |
| 西蒙氏枸橼酸盐琼脂 | |
| Simmons Citrate Agar |
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文献和实验2.5×1010个细胞/ml)。分装,-80℃或液氮保存待用。 2、病毒骨架质粒转化大肠杆菌,扩增,纯化。 3、将1-5ul (约1ug) 线性化的穿梭质粒及1ul(约100ng/ul)病毒骨架质粒(如pAdEasy-1)加入至含约40ul BJ5183电转感受态的EP管中混匀,冰上冷却。 4、将混合物加入电转杯,电击(1250-1500V/mm,5ms)。 5、电击结束取出样品,加入1ml SOC或LB培养液,37℃低速振荡40min。 6、取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性平板
用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒,电泳鉴定质粒完全被切开。 5. 胶回收线性化质粒,以备共转化使用。 二 共转化 1 大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 ² 从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌,接种于LB培养基中,37℃振摇过夜。 ² 接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基,37℃振摇,至OD600 达到0.4。 ² 迅速将培养物置于冰浴中30min,至充分冷却。 ²
菌种活化:干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株; 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株: 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中,划线接种于营养琼脂平板上,36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌:菌落凸起,圆形,不透明; b. 大肠埃希氏菌:菌落稍凸,圆形,湿润,乳白色; c. 铜绿假单胞菌:菌落扁平,圆形,边缘不整齐,光滑湿润,可产生蓝绿或黄绿色素; d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
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