- ￥2200 - 4880
- wksubio
- 1023
- 国内
- 2026年01月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Super Fluor 488
- CAS号：
1023
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
1mg/5mg
| 规格： | 1mg | 产品价格： | ￥2200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5mg | 产品价格： | ￥4880.0 |
5mg 4880元
Super Flour 系列荧光探针，具有更强的荧光强度，更广的pH应用范围（pH 4～10）, 更好的抗淬灭性。在生物荧光领域已逐渐替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等荧光染料。
常见问题：
1．标记效率低——计算结果显示每摩尔145,000 MW 的蛋白标记的荧光团少于4mol
有以下原因：
1）缓冲液中含有痕量伯铵成分，与染料反应降低了标记效率。如果蛋白已经溶于含氨基的缓冲液（如Tris或氨基乙酸），标记前用PBS透析。
2）蛋白含量较低 (≤1 mg/mL)会影响标记效率。
3）标记步骤中加入碳酸氢钠的作用是将反应混合物的pH升高至～8，因为在弱碱性环境中标记反应的效率*。如果蛋白溶液的缓冲范围在低pH，加入重碳酸盐也无法将pH调节至最适水平。要么加大重碳酸盐的量，要么将缓冲液换成PBS，或用0.1 M碳酸氢钠透析等。
4）研究显示pH升至9.0～9.4，标记效率和标记速度（只需10min）明显改善。
5）不同抗体与荧光团的反应速率不同，染料标记后保留的生物活性程度也不同，因此标准步骤也不是总有*的标记结果。为增加标记率，可以对同一样品进行再标记，或减少蛋白的量加大染料的量重新标记。有研究者在室温孵育1小时后再4℃孵育过夜，情况有所改善。
2．过标记——计算结果显示每摩尔145,000 MW 的蛋白标记的荧光团大于10mol。虽然过标
记的蛋白也可以使用，但可能会引起蛋白的聚集、降低抗体结合抗原的特异性，这些都会造成非特异性结合。过标记还会引起荧光淬灭。可以增加蛋白或减少反应时间。
3．未结合染料难以去除——尽管大部分时候用分离柱可以较好的纯化蛋白偶联物，但仍可能会有痕量的游离染料留在偶联物溶液中，会使标记计算的值偏高。可用分离柱再次分离或透析去除。
4．蛋白或蛋白偶联物无法洗脱——不要再加缓冲液，只需再次离心一次或几次。
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文献和实验偶联物，最大限度的提高了信噪比。图2. CF染料的超强特异性；由于AF染料制备过程中含有大量带负电的磺化基团，容易非特异性结合正电基团，请看AF790 Dye与CF790的条带特异性对比。3. 优异的标记效率生物偶联后的活性染料一般很容易水解，会在运输，操作及储存中带来诸多不便，最终致染料结合效率低下。像Alexa Fluor® dyes,DyLight? dyes and IRDyes®等严重的磺化作用有较强的吸湿性，恶化水解作用等问题。例如： AlexaFluor® 488 在应用时琥珀酰亚胺脂酯
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，Alexa Fluor 488）和γH2AX（红色，Alexa Fluor 594）。通道合并图像显示 CDH4 和γH2AX 的共定位。
