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- 文献和实验
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- 英文名:
3-Bromochlorobenzene;
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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
108-37-2
- 规格:
10mg/50mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验聚合酶等 操作方法 1. 以标准方法从细胞株中分离总RNA;以适当的转录系统合成AW108cRNA,cRNA产物经oligo(dT)柱纯化,测其260nmOD值,并计算含量; 2. 用10μl逆转录反应系统,加入1μg细胞总RNA,1.77×102 ~1.77×107 个分子的AW108 RNA,1×PCR缓冲液,1mmol/L DTT,0.5mmol/L 4种dNTP,10U RNA酶抑制剂,0.1μg 0ligo(dT)引物,1μl MMLV逆转录酶。于37℃保温60
的菌株在30oC而不是在37oC生长,更有利于连接。作简单的亚克隆连接实验,亚克隆转化效率的感受态细胞就可满足克隆需要,更高转化效率的感受态细胞可用于作比较困难的克隆实验。为提高获得目的克隆的机会,应用尽可能高转化效率的感受态细胞(>108克隆/μg DNA)。 (2)大肠杆菌基因型 hsdR 有利于非甲基化DNA(如PCR扩增产物)的有效转化。 mcrA 有利于甲基化DNA(如基因组)的有效转化。 acZΔM15 用于蓝白斑筛选。 endA1 无Endonuclease I 酶活性,有利
基的离心管中,轻轻震荡混匀后,放置于 37℃ 培养箱中解离 1 h。每隔15min 轻轻震荡或吹打混匀一次。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 450g 离心 5min。 8、若细胞沉淀有明显的红色,则将细胞重悬于 5ml 的红细胞裂解液中,冰上孵育 10min 使红细胞裂解。 9、向细胞悬液中加入 5ml DMEM/F12 冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入
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