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10mL
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文献和实验:1, v/v)(6)DEPC-H2O 饱和酚:将 DEPC-H2O 和酚 1:1 混合,室温摇晃 1 小时,然后静止使其分层,吸除水相,再加入 DEPC-H2O 重复一次,此即 DEPC-H2O 饱和酚。(7)无水乙醇(8)75% 冰冷乙醇【实验方法与步骤】(1)取离心洗涤后的 1×106 培养细胞或相当量的研磨后的组织,加入 200? 滋 l GuSCN/25 mM)-巯基乙醇溶液,剧烈震荡使细胞裂解,此时溶液变黏稠;(2)加入下列成分:2M NaAc (pH4.0) 25? 滋 l,DEPC-H2
。 d. 立刻接操作步骤项下3。 2. 液氮研磨法: a. 取500μl裂解液RLT(已经加入β-巯基乙醇),转入1.5ml离心管中,加入50μl PLANTaid混匀备用。 b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后,取50mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒,充分裂解。 在56℃温育1-3分钟有助于裂解植物,但是淀粉含量高的植物不能温育,因为提高的温度可能导致淀粉膨胀。 c. 用带钝针头的一次性 1 ml(配0.9mm针头) 注射器抽打
2+ 通道硫巯基化,来维持间充质干细胞的功能和骨稳态。骨髓间充质干细胞产生H2S协助调节自我更新和成骨分化。H2S 缺乏会导致 Ca2+TRP 通道上多个半光氨酸残基的硫巯基化程度降低,产生钙内流异常。异常的钙内流会下调 PKC/Erk- 介导的 Wnt/β-catenin 信号,从而影响到成骨分化。结果提示通过无毒供体恢复 H2S 水平,可以治疗 H2S 缺乏导致的骨质疏松症等疾病。 有趣的事情来了。在验证 H2S 通过 Ca2+ 通道的巯基化调节钙内流时,研究人员将 BMMSCs 分成了 2 组
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