- ￥26
- 百生跃
- 中国
- BR1000320
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
Random Primer/Random Hexamers(50μM)
- 库存：
999
- 供应商：
百生跃
- 规格：
50μL
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文献和实验随机引物法探针标记 随机引物法的原理是使被称为随机引物(random primer)的长6个核苷酸的寡核苷酸片段与单链DNA或变性的双链DNA随机互补结合(退火)，以提供3， 羟基端，在无5， →3， 外切酶活性的DNA聚合酶大片段(如Klenow片段)作用下，在引物的3， 羟基末端逐个加上核苷酸直至下一个引物。当反应液中含有标记的核苷酸时，即形成标记的DNA探针。6个核苷酸混合物出现所有可能结合序列，引物与模板的结合以一种随机的方式发生，标记均匀跨越DNA全长。当以RNA
模板上结合，并作为新链合成的起点。根据 RNA 模板和下游应用，有三种基本类型的引物可供选用：oligo（dT）引物、随机引物和基因特异性引物（图 3）。 图 3. 反转录中的常用引物。 ❖ Oligo（dT）引物由 12-18 个脱氧胸腺核苷酸组成，可与真核 mRNA 的 poly（A）尾退火。其为从真核生物 mRNA 构建cDNA 文库、全长 cDNA 克隆和 cDNA 3'末端快速扩增（3'RACE）的最佳选择。由于 oligo（dT）引物对 poly（A） 尾的特异性，其不适用于降解
随机引物法：利用寡核苷酸延伸法进行纯化 DNA 片段的放射性标记 1. 在一个 0.5ml 的微量离心管中加入溶于 30 μ l 水的模板 DNA(25ng) 及 1 μ l 随机脱氧核苷酸引物（约 125ng ）。盖紧微量离心管，置于沸水浴中 2min 。 2. 将微量离心管移至冰上放置 1min ， 4 ℃下离心 10s 使引物与模板的混合物沉降至管底，将微量离心管重新置于冰上。 3.
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