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- Xybio
- 上海
- P1539
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
WB800N Strain
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：WB800N枯草芽孢杆菌
别称: WB800N Strain
抗性：
培养基：LB
菌株类别：枯草杆菌
培养条件：37℃，有氧，LB
质粒转化：电转、
保存方式：20%甘油，-20℃
基本应用：枯草杆菌表达
质粒简介
WB800N是一种WB800改造过的枯草杆菌表达菌，具有neomycin(新霉素)抗性，可用LB培养基37℃培养，可加20%甘油保存于-80℃。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1471/pREP4/BL21大肠表达菌 |
| P1472/BL21(DE3)大肠表达菌 |
| P1473/pREP4/BL21(DE3)大肠表达菌 |
| P1474/BL21(DE3)pLysS大肠有毒蛋白表达菌 |
| P1475/BL21 CodonPlus (DE3)大肠表达菌 |
| P1476/BL21 CodonPlus (DE3)-RIPL大肠表达菌 |
| P1477/BL21-AI大肠严谨表达菌 |
| P1478/BL21trxB(DE3)大肠表达菌 |
| P1479/BL21Gold (DE3) pLysS大肠表达菌 |
| P1764/SHuffle T7 Express lysY大肠表达菌 |
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文献和实验Marburg遗传背景清楚，是研究枯草芽孢杆菌的标准菌株；AS1作为胞内表达的备用菌株，常用于表达外源蛋白。而胞外蛋白酶缺陷菌株WB800N能有效解决由于枯草芽孢杆菌丰富的蛋白酶导致的蛋白表达产物降解问题。 2 给力的表达载体 大部分的枯草芽孢杆菌不含内源性质粒，并且一般不能识别大肠杆菌中的启动子。最初的枯草芽孢杆菌载体源于金黄色葡萄球菌，其结构不稳定并易丢失。现在普遍使用的质粒载体是由枯草芽孢杆菌隐性质粒与大肠杆菌质粒构成的穿梭载体，可在大肠杆菌中完成基因片段的连接克隆
看看说明书。 林杉201212 1.抗体浓度：一般用说明书推荐的浓度稍稍高一点即可，如推荐1:1000，可用1:800； 小瘪瘪 哦，这个我知道，我现在主要是还做，同学都说实验失败就在于这个稀释的度，这个蛋白分子量很小，只有800多，都说跑不大出来，一般分子量都是1W多，请问分子量小的还可以用其他方法么？yangbxys wrote: 没有做过cyt C，但是做过WB。每次买抗体，都有说明
antibody是一家专业化生产和销售细胞信号通路磷酸化抗体的公司，公司产品800余种，覆盖AKT,NF-KB,MAPK,insulin,receptor, kinase,adaptor等方面，每种抗体都经过严格的WB,IHC,IF验证，价格实惠，欢迎查询，www.signalwayantibody.com，采购信息请联系我 夏先生，13655183492，xsk_bio@163.com，MSN: XSK_BIO@163.COM. 同时我们提供细胞信号通路的抑制剂，细胞因子，WB
