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- Xybio
- 上海
- P1535
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
C58C1 Strain
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：C58C1发根农杆菌
别称: C58C1 Strain
基本信息：
抗性：Rif+Gen
培养基：YEB
菌株类别：农杆菌
培养条件：28℃，有氧，YEB
质粒转化：电转、化转
保存方式：30%甘油，-20℃
基本应用：转基因
质粒简介
C58C1质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1366/pNZ8148乳酸菌分泌质粒 |
| P3829/pNZ8148质粒菌种 |
| P0302/pAN7-1真菌表达质粒 |
| P0990/pAN8-1-gpdA真菌表达质粒 |
| P0303/pBARGPE1真菌表达质粒 |
| P0304/pBARGPE1-Kan真菌表达质粒 |
| P0381/pBARGPE1-Hygro真菌表达质粒 |
| P0382/pBARGPE1-mCherry真菌表达质粒 |
| P0412/pBARGPE1-EGFP真菌表达质粒 |
| P0407/pBARGPE1-Hygro-EGFP真菌表达质粒 |
| P3476/pBARGPE1-EGFP-BenA真菌表达质粒 |
| P3026/pBARGPE1-PyrG真菌表达质粒 |
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文献和实验中具有更重要的意义。 1. 毛状根诱导常用菌种 常用于实验的发根农杆菌（ Agrobacterium rhizogenes ）有：ATCC15834、ATCC39207、G58P GV3296、A4、NCPPB2659、Rl500、Rl601、LBA9402、TRl05等菌株，这些菌株中含有侵入性致根质粒（root inducing plasmid）Ri质粒。 2. 毛状根的诱导操作（以黄芪为例简述毛状根的诱导方法） ①黄芪无菌
Agrobacterium growth and transformation (农杆菌培养及转化)
. The most commonly used strains LBA4404 and GV3101 carry chromosomal resistance to rifampicin, each has a Ti-plasmid (carrying vir [virulence] genes) which encodes another antibiotic resistance. This is summarised in the table below. GV3101 are the same as ‘C58C1RifR
115 Y187 Y2Hgold X33 KM31 INVSC1 A4发根农杆菌 PB1121/EHA105 PCMBIA1301/EHA105 LBA9402 AH109
