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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
BC126175.1;AMOG
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:AH109酵母双杂交菌菌
别称: BC126175.1;AMOG
| 复制子: | pUC |
|---|---|
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 备注: | 873bp |
质粒属性
| 载体宿主: | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 载体用途: | PCR模板 |
| 基因种属: | 人 |
| 基因类型: | cDNA |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | |
| 荧光蛋白: |
pCR4-TOPO-ATP1B2(human)
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P2960/pYIP5酵母质粒 |
| P0125/pHT01枯草胞内质粒 |
| P0127/pHT304枯草胞内质粒 |
| P0276/pSTOP1622枯草胞内质粒 |
| P3143/pMK4枯草杆菌质粒 |
| P1419/pMA5枯草胞内质粒 |
| P1420/pMA0911枯草胞内质粒 |
| P1611/pHY-P43枯草胞内质粒 |
| P0131/pWB980枯草分泌质粒菌种 |
| P4543/pWB980质粒菌种 |
| P0126/pHT43枯草分泌质粒 |
| P0704/pHT43-His枯草分泌质粒 |
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文献和实验大肠菌群的含量为:108个/g一109个/g。若水中或食品中发现有大肠菌群,即可证实已被粪便污染,有粪便污染也就有可能有肠道病原菌存在。根据这个理由,就可以认为这种含有大肠菌群的水或食品供食用是不安全的。所以目前为评定食品的卫生质量而进行检验时,也都采用大肠菌群或大肠杆菌作为粪便污染的指标细菌。当然,有粪便污染,不一定就有肠道病原菌存在,但即使无病原菌,只要被粪便污染的水或食品,也是不卫生的,不受人喜欢的。2.粪便污染指标菌的选择 作为理想的粪便污染的指标菌应具备以下几个特性,才能起到比较
hhyy601 别人赠予基因腺病毒质粒,邮寄过来的,拿到后,我该怎么办?多谢! freecell 版内以前有讨论的。如果是点在滤纸上的,将滤纸减碎,然后浸泡在TE溶液中若干时间。随后低速离心,取上清。用滤膜过滤。将消毒的TE溶液转化相应宿主菌扩增即可。 whbf5 转化DH5a或者jm109这一类的菌中保种和扩增 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯
的dsRNA 转染到AH109细胞株,涂在 150ㅠ待 3~5天克隆出现 并长势饱满. 3. 每个150ㅠ, 放入5ml freezing media ,将细胞收集在一起,均匀混合,1ml 分装, -70度保存。 二 :酵母双杂交 1 . mating , mating product 分别涂在 40个 TDO(SD/-H -L -T), 10个 QDO( SD/-A-H-L-T) 。 2 . mating efficiency 3% 大于下限值2%。 3 . 实验步骤说明上,说3-8天










