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- Xybio
- 上海
- P1489
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Origami B(DE3) Strain
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：Origami B(DE3)大肠表达菌
别称: Origami B(DE3) Strain
抗性：Kan/Tet
培养基：LB
菌株类别：大肠杆菌
培养条件：37℃，有氧，LB
质粒转化：42℃热激
保存方式：20%甘油，-20℃
基本应用：用于蛋白表达
备注：
质粒简介
OrigamiB(DE3)属于大肠杆菌表达型菌种，可使用LB培养基在37℃有氧的条件下进行培养，OrigamiB(DE3)的感受态细胞可以在42℃下热激处理转化质粒。使用IPTG可以诱导目的基因高效表达。
OrigamiB系列菌株同样具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突变，但是该菌株是来源于BL21的lacZY基因突变株。所以，OrigamiB系列菌株是集合BL21，Tuner和Origami三种菌株的优点于一身。在thioredoxinreductase(trxB)和glutathionereductase(gor)基因上同时含有突变，这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键，有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性，所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。DE3是溶源性的λDE3,所以在lacUV5启动子下携带有T7RNA聚合酶的染色体拷贝，因此该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1671/pBK-VQR-BE3哺乳编辑质粒 |
| P1672/pBK-VRER-BE3哺乳编辑质粒 |
| P2021/pBK-YEE-BE3哺乳编辑质粒 |
| P1673/SaBE4-Gam哺乳编辑质粒 |
| P1674/BE4-Gam哺乳编辑质粒 |
| P4948/pC015 - dLwCas13a-NF哺乳编辑质粒 |
| P4949/pC016 - LwCas13a guide expression backbone with U6 promoter哺乳编辑质粒 |
| P2887/pC034 - LwCas13a-msfGFP-2A-Blast哺乳编辑质粒 |
| P2166/pC0043-PspCas13b crRNA backbone哺乳编辑质粒 |
| P2167/pC0046-EF1a-PspCas13b-NES-HIV哺乳编辑质粒 |
| P2022/pC0055-CMV-dPspCas13b-GS-ADAR2DD(E488Q/T375G)-delta-984-1090哺乳编辑质粒 |
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文献和实验DNA Origami: Synthesis and Self‐Assembly
origami assemblies using a four‐way connector. Chem. Commun. 47:3213‐3215. Endo, M., Hidaka, K., and Sugiyama, H. 2011b. Direct AFM observation of an opening event of a DNA
存在于光合细菌的叶绿素中，与光合作用中光能的吸收和转换有关系。菌绿素 a是红色光合细菌中起主要同化作用的色素，在绿色光合细菌中也有少量存在。菌绿素 b存在于红色假单胞菌属（ Rhodopseudomonas）和荚硫菌属（ Thiocap-sa）的细菌中。菌绿素 a和 b的基本结构是四氢卟吩。菌绿素 c[又称绿硫菌叶绿素 -660（ chlorobium chloro-phyll-660）、菌绿胶（ bacterioviridin） ]和菌绿素 d（绿硫菌叶绿素
，另外，还有囊状体、刚毛、菌丝柱等不孕器官，因种而异。 绝大部分种类生于腐木上，一小部分种类生于腐殖质或土壤上；通常以腐生和兼性寄生为主，只有少数是寄生。 本目是一个大而异型的目，所包括真菌种类的亲缘关系和进化趋向比较复杂。 E． J． H．科纳认为多孔菌子实体里的菌丝体系类型是分类的主要依据。 M． A．东克（ 1964）将本目下分 21科， P． H． B．塔尔博特（ 1973）分 23科。 本目有些种类是森林和经济树木的病原菌，有些种类造成木材腐朽，使铁道枕木、木构桥梁、电杆等遭受严重
