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无锡云萃生物
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9000-70-8
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| 规格： | 5mg | 产品价格： | ￥100.0 |
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云萃
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文献和实验，5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基，将 iPSCs 接种于明胶上，添加 10ml iPSCs（I）培养基，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 定向内胚层分化 4、在 60mm 培养皿中加入 2ml Matrigel，室温静置 2h 并添加 DMEM-F12 培养基至完全没过 Matrigel。 5、用不含 Ca2+/Mg2+ 的 PBS 冲洗 iPSCs 后，加入 300μl Accutase，37℃ 孵育
0.1%（w/v）的明胶，室温静置 15min 至明胶凝固。 2、在明胶上接种丝裂霉素处理过的 MEFs 细胞悬浮液，细胞数约为 1.8×106个。放置在 7℃，5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基，将 ESCs 接种于明胶上，添加 10ml ESCs 培养基，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 4、向 hESCs 中加入 1ml TrypLE Express，并将培养皿放置在 37℃ 条件下进行解离，直到所有的细胞都以小细胞
Chemicon公司的CpGenome DNA Modification Kit 的protocol修正
。 6. 70%乙醇清洗3次，每次9000rpm 1 分钟，最后一次13000rpm2min。 7. 加入20mM NaOH/90%EtOH后，反映5分钟。 8. 不要去掉20mM NaOH/90%EtOH，直接加入90%乙醇后离心，9000rpm 1min 9. 90%乙醇清洗2次，每次9000 rpm 1 min，最后一次13000rpm 3min 10. PH 7.5 TE buffer 65度 溶解 15 min PS: 如果发现ＰＣＲ
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