7-氟-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]恶嗪,563

乳酸脱氢酶活力测定

。 试剂和器材 一.试剂 50mmol/L pH6.5磷酸氢二钾－磷酸二氢钾缓冲液母液： A: 50 mmol/L K2HPO4: 称K2HPO41.74g加蒸馏水溶解后定容至200mL。 B: 50 mmol/LK2HPO4: 称KH2PO43.40g加蒸馏水溶解后定容至500mL。 取溶液A 31.5mL ＋溶液B 68.5mL, 调节pH至6.5。置4℃冰箱备用。 10mmol/L pH 6.5磷酸氢二钾－磷酸二氢钾缓冲液用上述母液

体外哺乳类细胞（V79/HGPRT）基因突变试验－ 中华仓鼠肺细胞染色体突变实验

受试物的致突变性。 3  材料和试剂 3.1  细胞：使用中国仓鼠肺（v79）细胞株。为了减少自发突变率，正式实验前先将野生型细胞群体中存在的自发HGPRT座位突变体选择性杀灭，方法是将野生型细胞接种于含次黄嘌呤及胸腺嘧啶，氨甲氨甲喋呤，甘氨酸的MEM培养液中培养1周，然后重新接种于MEM培养液中。 3.2  培养液：采用MEM（Eagle）基础培养液或DMEM培养液，补以10％小牛血清及适量抗菌素（青霉素，链霉素）。 3.3  磷酸缓冲液（无钙、镁PBS） 磷酸二氢钾

【交流】体外哺乳类细胞（V79HGPRT）基因突变试验（GB）

基亚硝基肌（MNNG），苯并(a)芘(BP)等。 3.7  6－TG用0.5％碳酸氢钠溶液配成1.0 mg/ml，4℃贮存。 3.8  大鼠肝匀浆S-9混合物，按Ames试验程序制备。 4  实验步骤 4.1  细胞准备：将5×105个细胞接种于直径为100 mm平皿中，于37℃，5%二氧化碳培养箱中放置 24h． 4.2  接触受试物：吸去培养液，PBS洗两次，加入无血清培养液及一定浓度的受试物（需代谢活化者同时加人大鼠肝匀浆S-9混合物），置于培养箱中2h，结束后吸去含受试物的培养