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- 上海
- P0299
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pMG36e
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pMG36e乳酸菌胞内质粒
别称: pMG36e
质粒属性
质粒简介
乳酸乳球菌通用表达质粒pMG36e是一个经典的人工构建的组成型表达载体，是以乳酸乳球菌乳脂亚种蛋白酶基因的转录和翻译信号为基础构建而成的。它包含一个强启动子，能够在多种细菌中表达外源蛋白。已用于研究细菌素作用机制，乳酸菌基因工程菌株的改造以及口服疫苗的开发等，应用领域十分广泛，已成为乳酸菌基因工程研究的重要工具质粒之一。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3610 bp ds-DNA circular SYN 14-JUL-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pMG36e
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3610)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Thursday, July 14, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3610
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS 227..925
/codon_start=1
/note="repA"
/translation="MAIKNTKARNFGFLLYPDSIPNDWKEKLESLGVSMAVSPLHDMDE
KKDKDTWNSSDVIRNGKHYKKPHYHVIYIARNPVTIESVRNKIKRKLGNSSVAHVEILD
YIKGSYEYLTHESKDAIAKNKHIYDKKDILNINDFDIDRYITLDESQKRELKNLLLDIV
DDYNLVNTKDLMAFIRLRGAEFGILNTNDVKDIVSTNSSAFRLWFEGNYQCGYRASYAK
VLDAETGEIK"
CDS complement(1463..2197)
/codon_start=1
/note="Emr"
/translation="MNEKNIKHSQNFITSKHNIDKIMTNIRLNEHDNIFEIGSGKGHFT
LELVKRCNFVTAIEIDHKLCKTTENKLVDHDNFQVLNKDILQFKFPKNQSYKIYGNIPY
NISTDIIRKIVFDSIANEIYLIVEYGFAKRLLNTKRSLALLLMAEVDISILSMVPREYF
HPKPKVNSSLIRLSRKKSRISHKDKQKYNYFVMKWVNKEYKKIFTKNQFNNSLKHAGID
DLNNISFEQFLSLFNSYKLFNK"
misc_feature 2474..2652
/note="P32"
CDS 2653..2892
/codon_start=1
/note="ORF"
/translation="MAIVSAEKFVIRARPGIDPLESTCRHASLQSLKTKVAAAVEAAKT
VGKGDGTTGTSDKGGGQGTPALRYLELRFKVKWY"
CDS complement(3215..3226)
/codon_start=1
/product="Factor Xa recognition and cleavage site"
/note="Factor Xa site"
/translation="IEGR"
ORIGIN
1 ggtgatttca gaatcgaaaa aaagagttat gatttctctg acaaaagagc aagataaaaa
61 attaacagat atggcgaaac aaaaaggttt ttcaaaatct gcggttgcgg cgttagctat
121 agaagaatat gcaagaaagg aatcagaaca aaaaaaataa gcgaaagctc gcgtttttag
181 aaggatacga gttttcgcta cttgtttttg ataaggtaat tatatcatgg ctattaaaaa
241 tactaaagct agaaattttg gatttttatt atatcctgac tcaattccta atgattggaa
301 agaaaaatta gagagtttgg gcgtatctat ggctgtcagt cctttacacg atatggacga
361 aaaaaaagat aaagatacat ggaatagtag tgatgttata cgaaatggaa agcactataa
421 aaaaccacac tatcacgtta tatatattgc acgaaatcct gtaacaatag aaagcgttag
481 gaacaagatt aagcgaaaat tggggaatag ttcagttgct catgttgaga tacttgatta
541 tatcaaaggt tcatatgaat atttgactca tgaatcaaag gacgctattg ctaagaataa
601 acatatatac gacaaaaaag atattttgaa cattaatgat tttgatattg accgctatat
661 aacacttgat gaaagccaaa aaagagaatt gaagaattta cttttagata tagtggatga
721 ctataatttg gtaaatacaa aagatttaat ggcttttatt cgccttaggg gagcggagtt
781 tggaatttta aatacgaatg atgtaaaaga tattgtttca acaaactcta gcgcctttag
841 attatggttt gagggcaatt atcagtgtgg atatagagca agttatgcaa aggttcttga
901 tgctgaaacg ggggaaataa aatgacaaac aaagaaaaag agttatttgc tgaaaatgag
961 gaattaaaaa aagaaattaa ggacttaaaa gagcgtattg aaagatacag agaaatggaa
1021 gttgaattaa gtacaacaat agatttattg agaggaggga ttattgaata aataaaagcc
1081 ccctgacgaa agtcgaaggg ggtttttatt ttggtttgat gttgcgatta atagcaatac
1141 aattgcaata aacaaaatga tcgacctcgg gacccctatc tagcgaactt ttagaaaaga
1201 tataaaacat cagagtatgg acagttgcgg atgtacttca gaaaagatta gatgtctaaa
1261 aagctagctt tttagacatc taaatctagg tactaaaaca attcatccag taaaatataa
1321 tattttattt tctcccaatc aggcttgatc cccagtaagt caaaaaatag ctcgacatac
1381 tgttcttccc cgatcgaccc gattcacaaa aaataggcac acgaaaaaca agttaaggga
1441 tgcagtttat gcatccctta acttacttat taaataattt atagctattg aaaagagata
1501 agaattgttc aaagctaata ttgtttaaat cgtcaattcc tgcatgtttt aaggaattgt
1561 taaattgatt ttttgtaaat attttcttgt attctttgtt aacccatttc ataacgaaat
1621 aattatactt ttgtttatct ttgtgtgata ttcttgattt ttttctactt aatctgataa
1681 gtgagctatt cactttaggt ttaggatgaa aatattctct tggaaccata cttaatatag
1741 aaatatcaac ttctgccatt aaaagtaatg ccaatgagcg ttttgtattt aataatcttt
1801 tagcaaaccc gtattccacg attaaataaa tctcattagc tatactatca aaaacaattt
1861 tgcgtattat atccgtactt atgttataag gtatattacc atatatttta taggattggt
1921 ttttaggaaa tttaaactgc aatatatcct tgtttaaaac ttggaaatta tcgtgatcaa
1981 caagtttatt ttctgtagtt ttgcataatt tatggtctat ttcaatggca gttacgaaat
2041 tacacctctt tactaattca agggtaaaat ggccttttcc tgagccgatt tcaaagatat
2101 tatcatgttc atttaatctt atatttgtca ttattttatc tatattatgt tttgaagtaa
2161 taaagttttg actgtgtttt atatttttct cgttcattat aaccctcttt aatttggtta
2221 tatgaatttt gcttattaac gattcattat aaccacttat tttttgtttg gttgataatg
2281 aactgtgctg attacaaaaa tactaaaaat gcccatattt tttcctcctt ataaaattag
2341 tataattata gcacggtcga tcttctatat aaaagatata ttatcttatc agtattgtca
2401 atatattcaa ggcaatctgc ctcctcatcc tcttcatcct cttcgtcttg gtagcttttt
2461 aaatatgggt cgatcgaatt cggtcctcgg gatatgataa gattaatagt tttagctatt
2521 aatctttttt tatttttatt taagaatggc ttaataaagc ggttactttg gatttttgtg
2581 agcttggact agaaaaaaac ttcacaaaat gctatactag gtaggtaaaa aaatattcgg
2641 aggaattttg aaatggcaat cgtttcagca gaaaaattcg taattcgagc tcgcccgggg
2701 atcgatcctc tagagtcgac ctgcaggcat gcaagcttgc aaagtctgaa aacgaaggtg
2761 gcagctgccg ttgaagcggc caagacagtt ggtaaaggcg acggtacaac cggtactagc
2821 gacaaaggcg gcggtcaagg taccccggcg ctacgatatt tggagttgag gttcaaagtc
2881 aaatggtact gatgaccggt aaaatttaat attttgaacc ttgcttaggc agctgacttc
2941 acattgttga gatcagctgc cttttgctta tagttcattg agtagaaacg gttctgttgc
3001 gaagtttgaa aatcaaacgc aagctcgatt ttttattaaa acgtctcaaa atcgtttctg
3061 agacgtttta gcgtttattt cgtttagtta tcggcataat cgttaaaaca ggcgttatcg
3121 tagcgtaaaa gcccttgagc gtagcgtggc tttgcagcga agatgttgtc tgttagatta
3181 tgaaagccga tgactgaatg aaataataag cgcagcgccc ttctatttcg gttggaggag
3241 gctcaaggga gtatgaggga atgaaattcc ctcatgggtt tgattttaaa aattgcttgc
3301 aattttgccg agcggtagcg ctggaaaatt tttgaaaaaa atttggaatt tggaaaaaaa
3361 tggggggaaa ggaagcgaat tttgcttccg tactacgacc ccccattaag tgccgagtgc
3421 caatttttgt gccaaaaacg ctctatccca actggctcaa gggtttaagg ggtttttcaa
3481 tcgccaacga atcgccaacg ttttcgccaa cgttttttat aaatctatat ttaagtagct
3541 ttattgttgt ttttatgatt acaaagtgat acactaactt tataaaatta tttgattgga
3601 gttttttaat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pMG36e乳酸菌胞内质粒
别称: pMG36e
| 启动子: | P32 |
|---|---|
| 复制子: | pWV01 |
| 终止子: | T |
| 质粒分类: | 乳酸乳球菌组成型表达质粒 |
| 质粒大小: | 3610bp |
| 原核抗性: | Ery |
| 筛选标记: | Ery |
| 克隆菌株: | MC1061 |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 乳酸乳球菌 |
| 诱导方式: | 无需诱导 |
| 5'测序引物: | 根据序列设计 |
| 3'测序引物: | 根据序列设计 |
质粒属性
| 载体宿主： | 乳酸菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Ery |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
乳酸乳球菌通用表达质粒pMG36e是一个经典的人工构建的组成型表达载体，是以乳酸乳球菌乳脂亚种蛋白酶基因的转录和翻译信号为基础构建而成的。它包含一个强启动子，能够在多种细菌中表达外源蛋白。已用于研究细菌素作用机制，乳酸菌基因工程菌株的改造以及口服疫苗的开发等，应用领域十分广泛，已成为乳酸菌基因工程研究的重要工具质粒之一。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3610 bp ds-DNA circular SYN 14-JUL-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pMG36e
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3610)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Thursday, July 14, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3610
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS 227..925
/codon_start=1
/note="repA"
/translation="MAIKNTKARNFGFLLYPDSIPNDWKEKLESLGVSMAVSPLHDMDE
KKDKDTWNSSDVIRNGKHYKKPHYHVIYIARNPVTIESVRNKIKRKLGNSSVAHVEILD
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DDYNLVNTKDLMAFIRLRGAEFGILNTNDVKDIVSTNSSAFRLWFEGNYQCGYRASYAK
VLDAETGEIK"
CDS complement(1463..2197)
/codon_start=1
/note="Emr"
/translation="MNEKNIKHSQNFITSKHNIDKIMTNIRLNEHDNIFEIGSGKGHFT
LELVKRCNFVTAIEIDHKLCKTTENKLVDHDNFQVLNKDILQFKFPKNQSYKIYGNIPY
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DLNNISFEQFLSLFNSYKLFNK"
misc_feature 2474..2652
/note="P32"
CDS 2653..2892
/codon_start=1
/note="ORF"
/translation="MAIVSAEKFVIRARPGIDPLESTCRHASLQSLKTKVAAAVEAAKT
VGKGDGTTGTSDKGGGQGTPALRYLELRFKVKWY"
CDS complement(3215..3226)
/codon_start=1
/product="Factor Xa recognition and cleavage site"
/note="Factor Xa site"
/translation="IEGR"
ORIGIN
1 ggtgatttca gaatcgaaaa aaagagttat gatttctctg acaaaagagc aagataaaaa
61 attaacagat atggcgaaac aaaaaggttt ttcaaaatct gcggttgcgg cgttagctat
121 agaagaatat gcaagaaagg aatcagaaca aaaaaaataa gcgaaagctc gcgtttttag
181 aaggatacga gttttcgcta cttgtttttg ataaggtaat tatatcatgg ctattaaaaa
241 tactaaagct agaaattttg gatttttatt atatcctgac tcaattccta atgattggaa
301 agaaaaatta gagagtttgg gcgtatctat ggctgtcagt cctttacacg atatggacga
361 aaaaaaagat aaagatacat ggaatagtag tgatgttata cgaaatggaa agcactataa
421 aaaaccacac tatcacgtta tatatattgc acgaaatcct gtaacaatag aaagcgttag
481 gaacaagatt aagcgaaaat tggggaatag ttcagttgct catgttgaga tacttgatta
541 tatcaaaggt tcatatgaat atttgactca tgaatcaaag gacgctattg ctaagaataa
601 acatatatac gacaaaaaag atattttgaa cattaatgat tttgatattg accgctatat
661 aacacttgat gaaagccaaa aaagagaatt gaagaattta cttttagata tagtggatga
721 ctataatttg gtaaatacaa aagatttaat ggcttttatt cgccttaggg gagcggagtt
781 tggaatttta aatacgaatg atgtaaaaga tattgtttca acaaactcta gcgcctttag
841 attatggttt gagggcaatt atcagtgtgg atatagagca agttatgcaa aggttcttga
901 tgctgaaacg ggggaaataa aatgacaaac aaagaaaaag agttatttgc tgaaaatgag
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1201 tataaaacat cagagtatgg acagttgcgg atgtacttca gaaaagatta gatgtctaaa
1261 aagctagctt tttagacatc taaatctagg tactaaaaca attcatccag taaaatataa
1321 tattttattt tctcccaatc aggcttgatc cccagtaagt caaaaaatag ctcgacatac
1381 tgttcttccc cgatcgaccc gattcacaaa aaataggcac acgaaaaaca agttaaggga
1441 tgcagtttat gcatccctta acttacttat taaataattt atagctattg aaaagagata
1501 agaattgttc aaagctaata ttgtttaaat cgtcaattcc tgcatgtttt aaggaattgt
1561 taaattgatt ttttgtaaat attttcttgt attctttgtt aacccatttc ataacgaaat
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1681 gtgagctatt cactttaggt ttaggatgaa aatattctct tggaaccata cttaatatag
1741 aaatatcaac ttctgccatt aaaagtaatg ccaatgagcg ttttgtattt aataatcttt
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1981 caagtttatt ttctgtagtt ttgcataatt tatggtctat ttcaatggca gttacgaaat
2041 tacacctctt tactaattca agggtaaaat ggccttttcc tgagccgatt tcaaagatat
2101 tatcatgttc atttaatctt atatttgtca ttattttatc tatattatgt tttgaagtaa
2161 taaagttttg actgtgtttt atatttttct cgttcattat aaccctcttt aatttggtta
2221 tatgaatttt gcttattaac gattcattat aaccacttat tttttgtttg gttgataatg
2281 aactgtgctg attacaaaaa tactaaaaat gcccatattt tttcctcctt ataaaattag
2341 tataattata gcacggtcga tcttctatat aaaagatata ttatcttatc agtattgtca
2401 atatattcaa ggcaatctgc ctcctcatcc tcttcatcct cttcgtcttg gtagcttttt
2461 aaatatgggt cgatcgaatt cggtcctcgg gatatgataa gattaatagt tttagctatt
2521 aatctttttt tatttttatt taagaatggc ttaataaagc ggttactttg gatttttgtg
2581 agcttggact agaaaaaaac ttcacaaaat gctatactag gtaggtaaaa aaatattcgg
2641 aggaattttg aaatggcaat cgtttcagca gaaaaattcg taattcgagc tcgcccgggg
2701 atcgatcctc tagagtcgac ctgcaggcat gcaagcttgc aaagtctgaa aacgaaggtg
2761 gcagctgccg ttgaagcggc caagacagtt ggtaaaggcg acggtacaac cggtactagc
2821 gacaaaggcg gcggtcaagg taccccggcg ctacgatatt tggagttgag gttcaaagtc
2881 aaatggtact gatgaccggt aaaatttaat attttgaacc ttgcttaggc agctgacttc
2941 acattgttga gatcagctgc cttttgctta tagttcattg agtagaaacg gttctgttgc
3001 gaagtttgaa aatcaaacgc aagctcgatt ttttattaaa acgtctcaaa atcgtttctg
3061 agacgtttta gcgtttattt cgtttagtta tcggcataat cgttaaaaca ggcgttatcg
3121 tagcgtaaaa gcccttgagc gtagcgtggc tttgcagcga agatgttgtc tgttagatta
3181 tgaaagccga tgactgaatg aaataataag cgcagcgccc ttctatttcg gttggaggag
3241 gctcaaggga gtatgaggga atgaaattcc ctcatgggtt tgattttaaa aattgcttgc
3301 aattttgccg agcggtagcg ctggaaaatt tttgaaaaaa atttggaatt tggaaaaaaa
3361 tggggggaaa ggaagcgaat tttgcttccg tactacgacc ccccattaag tgccgagtgc
3421 caatttttgt gccaaaaacg ctctatccca actggctcaa gggtttaagg ggtttttcaa
3481 tcgccaacga atcgccaacg ttttcgccaa cgttttttat aaatctatat ttaagtagct
3541 ttattgttgt ttttatgatt acaaagtgat acactaactt tataaaatta tttgattgga
3601 gttttttaat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3642/pCMV-SPORT6-SPAG16人源基因质粒 |
| P3643/pCMV-SPORT6-LMO4人源基因质粒 |
| P3644/pCMV-SPORT6-HVCN1人源基因质粒 |
| P3646/pCMV-SPORT6-EMP3人源基因质粒 |
| P3647/pCMV-SPORT6-FKBP7人源基因质粒 |
| P4894/pCMV-SPORT6-GALNT14（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4895/pCMV-SPORT6-EIF4G2（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4896/pCMV-SPORT6-FGFR1人源基因质粒 |
| P4897/pCMV-SPORT6-KIAA0408人源基因质粒 |
| P4898/pCMV-SPORT6-AFAP1L2人源基因质粒 |
| P4899/pCMV-SPORT6-SLC38A2人源基因质粒 |
| P4900/pCMV-SPORT6-INTS7人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
-GFP 等）以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同，又可以分为高拷贝质粒（质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝）和低拷贝质粒（质粒在细胞内只有＜20 个拷贝）。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件，例如，复制起始位点（ORI），抗性基因，多克隆位点，启动子，终止子，标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点（ORI），否则无法进行复制；除了一些特殊质粒（如 minicircle plasmid）之外，绝大多数质粒都带有抗性基因，用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切，酶连或者同源
2425611 刚刚开始做实验 请教一个关于质粒比较基础的问题，质粒转染细胞后，是同细胞内的基因相融合后表达还是仍以质粒的环形形式存在表达？每个转染细胞内转染进入的质粒数量是怎么样的啊？这个数量和蛋白表达多少有没有关系？还有个问题是请问现在最常用的质粒转染技术是什么？ 菜鸟级的问题，请大家积极帮忙，多谢！！ wanadoo 两种转染。 酶切，基因相融合。非酶切，环形形式存在表达。我用lipofedamin
Melody_Arrow 构建的目的片段与红色荧光蛋白pDsRed融合表达的真核质粒，成功转入细胞后，很郁闷，红色荧光蛋白是在我片段的胞外段，貌似阻碍了我蛋白被抗体识别，所以，想问一下，有没有结构相对DsRed简单，分子量更小的荧光质粒呢？最好是红色荧光 不能把荧光蛋白放在胞内，还要做信号，放在胞内，怕会影响功能：（ 所以，想问问大家都知道有什么合适的质粒吗？ ffyy8888 红色荧光质粒的应该是pRFP最小
pMG36e乳酸菌胞内质粒
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