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- Xybio
- 上海
- P1233
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pUAST
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pUAST果蝇编辑质粒
别称: pUAST
| 原核抗性: | Amp |
|---|---|
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 昆虫细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 基因敲除 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
pUAST consists of five tandemly arrayed optimized GAL4 binding sites followed by the hsp70 TATA box and transcriptional start , a polylinker containing unique restriction sites for EcoRI, BglII, NotI, Xho, KpnI and XbaI and the SV40 small T intron and polyadenylation site. These features are included in a P-element vector (pCaSpeR3)containing the P element ends (P3' and P5') and the white gene which acts as a marker for successful incorporation into the Drosophila genome. More information: Brand and Perimon (1993) Development 118 401-415 P element-based vector for Gal4-regulated expression of genes in Drosophila.
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4063/pCMV-SPORT6-BTBD10(617-1284bp）人源基因质粒 |
| P4064/pCMV-SPORT6-CALM1人源基因质粒 |
| P4065/pCMV-SPORT6-DAD1人源基因质粒 |
| P4066/pCMV-SPORT6-CST3人源基因质粒 |
| P4067/pCMV-SPORT6-RPL13（2同义突变）人源基因质粒 |
| P4068/pCMV-SPORT6-RNF208人源基因质粒 |
| P4069/pCMV-SPORT6-UBE2F人源基因质粒 |
| P4070/pCMV-SPORT6-IMP3（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4071/pCMV-SPORT6-SNX12（1-477bp）人源基因质粒 |
| P4072/pCMV-SPORT6-CENPH（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4073/pCMV-SPORT6-CHURC1（10-420bp）人源基因质粒 |
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文献和实验1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
基因编辑再次升级！领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具，可安全高效进行体内基因编辑
选获得 v3.4 BE-eVLPs 系统。 最后，研究人员发现，不同包装质粒间的化学计量比也会影响 BE-eVLP 系统的编辑效果。为了调节这种化学计量学，他们改变了 gag-3xNES-ABE8e 与转染 VLP 的野生型 MMLV gag-pro-pol 质粒的比例。结果发现 gag-pro-pol 质粒与 gag-3XNES-ABE8e 质粒的摩尔比例为 1:3 时获得最佳的碱基编辑效率，并命名为第四代 BE-eVLPs 系统（v4 BE-eVLPs）。 随后的实验也证明，v
基因组编辑技术是指可以在基因组水平上对 DNA 序列进行定点改造的遗传操作技术，其在基因功能研究和改造、生物医学和植物遗传改良等方面都具有重大的应用价值。科学家自 20 世纪 90 年代末就开始探索基因组定点编辑技术，但直到 2002 年，也仅在小鼠和果蝇等少数模式生物中实现了同源重组介导的基因组定点编辑，且因同源重组的效率很低，限制了其应用前景。进入 21 世纪后，随着蛋白质结构与功能研究的新突破和人工核酸内切酶 (engineeredendonuclease，EEN) 技术的出现，将特异
