戊基-1,5-二胺二.盐.酸.盐,1476-39-7

流式课堂 | 外周血抗凝剂，选 EDTA or 肝素？

外周血是我们流式实验中常用到的样本之一。由于血液离体后会在凝血因子的作用下凝固（图1），采集外周血样本时，需要使用带抗凝剂的采血管，或采集后立即加入抗凝剂。通常，我们流式实验中用到的抗凝剂有两种：EDTA 和肝素。 图1：凝血（左）与抗凝（右）效果展示 1 两种抗凝剂的抗凝原理 EDTA（乙二胺四乙酸）： EDTA 能与血液中的 Ca2＋ 螯合，使 Ca2＋ 失去凝血作用，阻止血液凝固。常用的是钠盐或钾盐。 肝素： 加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶的作用，阻止凝血酶的形成和血

酶组织化学酶显示方法

细胞色素氧化酶和过氧化物酶，是Na―di反应用于检测氧化酶的方法。把二甲基―对―苯二胺和a―萘酚加入底物混合液中，由酶作用而释放的氧与此两者结合，形成靛酚蓝而显示酶的部位。也可以用4―氨基―N、N―二甲基萘胺(AND)代替二甲基―对―苯二胺。靛酚盐法原理 (3)靛蓝形成法(indigo formatlon method)：又称靛蓝法或吲哚酚法，在酶作用下，分解底物酯型吲哚酚化合物，产生出吲哚酚，在氧存在的情况下形成蓝色靛蓝，使酶存在部位显色。

荧光的淬灭及抗淬灭

没食子酸盐(propyl gallate，NPG)、1，4-二偶氮双环[2，2，2)-辛烷(1，4-diazobicyelo(2，2，2)-octane，DABCO)等。其中p-苯二胺是最有效的抗淬灭剂，但由于对光和热均有较强的敏感性，且具有毒性，因而限制了在体内的应用。理想的PPD抗淬灭剂混合液配方是：9份甘油、1份PBS和浓度在2～7retool/L之间的PPl)，最终pH为8．5～9．0。n-丙基没食子酸盐无毒性，对光和热稳定，但抗荧光漂白的效果不如PPl)，可用于体内研究。推荐浓度为3～