- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P2964
- 2025年07月12日
8 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pRS315-TEF-CYC1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pRS315-TEF-CYC1酿酒酵母质粒
别称: pRS315-TEF-CYC1
质粒属性
质粒简介
pRS315-TEF-CYC1酿酒酵母质粒
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6661 bp ds-DNA circular SYN 05-JUL-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pRS315-TEF-CYC1
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6661)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6661
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS complement(663..1757)
/codon_start=1
/gene="S. cerevisiae LEU2"
/product="3-isopropylmalate dehydrogenase, required for
leucine biosynthesis"
/note="LEU2"
/note="yeast auxotrophic marker"
/translation="MSAPKKIVVLPGDHVGQEITAEAIKVLKAISDVRSNVKFDFENHL
IGGAAIDATGVPLPDEALEASKKVDAVLLGAVGGPKWGTGSVRPEQGLLKIRKELQLYA
NLRPCNFASDSLLDLSPIKPQFAKGTDFVVVRELVGGIYFGKRKEDDGDGVAWDSEQYT
VPEVQRITRMAAFMALQHEPPLPIWSLDKANVLASSRLWRKTVEETIKNEFPTLKVQHQ
LIDSAAMILVKNPTHLNGIIITSNMFGDIISDEASVIPGSLGLLPSASLASLPDKNTAF
GLYEPCHGSAPDLPKNKVDPIATILSAAMMLKLSLNLPEEGKAIEDAVKKVLDAGIRTG
DLGGSNSTTEVGDAVAEEVKKILA"
promoter complement(1770..2174)
/gene="S. cerevisiae LEU2"
/note="LEU2 promoter"
rep_origin complement(2474..2929)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 3097..3115
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 3130..3528
/gene="S. cerevisiae TEF1"
/note="TEF1 promoter"
/note="promoter for EF-1-alpha"
misc_feature 3544..3614
/note="MCS"
terminator 3615..3862
/gene="S. cerevisiae CYC1"
/note="CYC1 terminator"
/note="transcription terminator for CYC1"
rep_origin complement(4328..4916)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5087..5947)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin,
and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFFHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5948..6052)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
misc_feature 6089..6592
/note="CEN/ARS"
/note="S. cerevisiae CEN6 centromere fused to an
autonomously replicating sequence"
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatcga ctacgtcgta aggccgtttc tgacagagta aaattcttga gggaactttc
241 accattatgg gaaatggttc aagaaggtat tgacttaaac tccatcaaat ggtcaggtca
301 ttgagtgttt tttatttgtt gtattttttt ttttttagag aaaatcctcc aatatcaaat
361 taggaatcgt agtttcatga ttttctgtta cacctaactt tttgtgtggt gccctcctcc
421 ttgtcaatat taatgttaaa gtgcaattct ttttccttat cacgttgagc cattagtatc
481 aatttgctta cctgtattcc tttactatcc tcctttttct ccttcttgat aaatgtatgt
541 agattgcgta tatagtttcg tctaccctat gaacatattc cattttgtaa tttcgtgtcg
601 tttctattat gaatttcatt tataaagttt atgtacaaat atcataaaaa aagagaatct
661 ttttaagcaa ggattttctt aacttcttcg gcgacagcat caccgacttc ggtggtactg
721 ttggaaccac ctaaatcacc agttctgata cctgcatcca aaaccttttt aactgcatct
781 tcaatggcct taccttcttc aggcaagttc aatgacaatt tcaacatcat tgcagcagac
841 aagatagtgg cgatagggtc aaccttattc tttggcaaat ctggagcaga accgtggcat
901 ggttcgtaca aaccaaatgc ggtgttcttg tctggcaaag aggccaagga cgcagatggc
961 aacaaaccca aggaacctgg gataacggag gcttcatcgg agatgatatc accaaacatg
1021 ttgctggtga ttataatacc atttaggtgg gttgggttct taactaggat catggcggca
1081 gaatcaatca attgatgttg aaccttcaat gtagggaatt cgttcttgat ggtttcctcc
1141 acagtttttc tccataatct tgaagaggcc aaaacattag ctttatccaa ggaccaaata
1201 ggcaatggtg gctcatgttg tagggccatg aaagcggcca ttcttgtgat tctttgcact
1261 tctggaacgg tgtattgttc actatcccaa gcgacaccat caccatcgtc ttcctttctc
1321 ttaccaaagt aaatacctcc cactaattct ctgacaacaa cgaagtcagt acctttagca
1381 aattgtggct tgattggaga taagtctaaa agagagtcgg atgcaaagtt acatggtctt
1441 aagttggcgt acaattgaag ttctttacgg atttttagta aaccttgttc aggtctaaca
1501 ctaccggtac cccatttagg accacccaca gcacctaaca aaacggcatc aaccttcttg
1561 gaggcttcca gcgcctcatc tggaagtggg acacctgtag catcgatagc agcaccacca
1621 attaaatgat tttcgaaatc gaacttgaca ttggaacgaa catcagaaat agctttaaga
1681 accttaatgg cttcggctgt gatttcttga ccaacgtggt cacctggcaa aacgacgatc
1741 ttcttagggg cagacatagg ggcagacatt agaatggtat atccttgaaa tatatatata
1801 tattgctgaa atgtaaaagg taagaaaagt tagaaagtaa gacgattgct aaccacctat
1861 tggaaaaaac aataggtcct taaataatat tgtcaacttc aagtattgtg atgcaagcat
1921 ttagtcatga acgcttctct attctatatg aaaagccggt tccggcctct cacctttcct
1981 ttttctccca atttttcagt tgaaaaaggt atatgcgtca ggcgacctct gaaattaaca
2041 aaaaatttcc agtcatcgaa tttgattctg tgcgatagcg cccctgtgtg ttctcgttat
2101 gttgaggaaa aaaataatgg ttgctaagag attcgaactc ttgcatctta cgatacctga
2161 gtattcccac agttaactgc ggtcaagata tttcttgaat caggcgcctt agaccgctcg
2221 gccaaacaac caattacttg ttgagaaata gagtataatt atcctataaa tataacgttt
2281 ttgaacacac atgaacaagg aagtacagga caattgattt tgaagagaat gtggattttg
2341 atgtaattgt tgggattcca tttttaataa ggcaataata ttaggtatgt ggatatacta
2401 gaagttctcc tcgagggtcg atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa
2461 ataccgcatc aggaaattgt aaacgttaat attttgttaa aattcgcgtt aaatttttgt
2521 taaatcagct cattttttaa ccaataggcc gaaatcggca aaatccctta taaatcaaaa
2581 gaatagaccg agatagggtt gagtgttgtt ccagtttgga acaagagtcc actattaaag
2641 aacgtggact ccaacgtcaa agggcgaaaa accgtctatc agggcgatgg cccactacgt
2701 gaaccatcac cctaatcaag ttttttgggg tcgaggtgcc gtaaagcact aaatcggaac
2761 cctaaaggga gcccccgatt tagagcttga cggggaaagc cggcgaacgt ggcgagaaag
2821 gaagggaaga aagcgaaagg agcgggcgct agggcgctgg caagtgtagc ggtcacgctg
2881 cgcgtaacca ccacacccgc cgcgcttaat gcgccgctac agggcgcgtc gcgccattcg
2941 ccattcaggc tgcgcaactg ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc gctattacgc
3001 cagctggcga aggggggatg tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc agggttttcc
3061 cagtcacgac gttgtaaaac gacggccagt gaattgtaat acgactcact atagggcgaa
3121 ttggagctcc atagcttcaa aatgtttcta ctcctttttt actcttccag attttctcgg
3181 actccgcgca tcgccgtacc acttcaaaac acccaagcac agcatactaa atttcccctc
3241 tttcttcctc tagggtgtcg ttaattaccc gtactaaagg tttggaaaag aaaaaagaga
3301 ccgcctcgtt tctttttctt cgtcgaaaaa ggcaataaaa atttttatca cgtttctttt
3361 tcttgaaaat tttttttttg atttttttct ctttcgatga cctcccattg atatttaagt
3421 taataaacgg tcttcaattt ctcaagtttc agtttcattt ttcttgttct attacaactt
3481 tttttacttc ttgctcatta gaaagaaagc atagcaatct aatctaagtt ttctagaact
3541 agcgcggccg ctctagaact agtggatccc ccgggctgca ggaattcgat atcaagctta
3601 tcgataccgt cgactcatgt aattagttat gtcacgctta cattcacgcc ctccccccac
3661 atccgctcta accgaaaagg aaggagttag acaacctgaa gtctaggtcc ctatttattt
3721 ttttatagtt atgttagtat taagaacgtt atttatattt caaatttttc ttttttttct
3781 gtacagacgc gtgtacgcat gtaacattat actgaaaacc ttgcttgaga aggttttggg
3841 acgctcgaag gctttaattt gcgggcccgg tacccagctt ttgttccctt tagtgagggt
3901 taattccgag cttggcgtaa tcatggtcat agctgtttcc tgtgtgaaat tgttatccgc
3961 tcacaattcc acacaacata ggagccggaa gcataaagtg taaagcctgg ggtgcctaat
4021 gagtgaggta actcacatta attgcgttgc gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc
4081 tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg
4141 ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag
4201 cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac agaatcaggg gataacgcag
4261 gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc
4321 tggcgttttt ccataggctc ggcccccctg acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc
4381 agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa gataccaggc gttcccccct ggaagctccc
4441 tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt
4501 cgggaagcgt ggcgctttct caatgctcac gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg
4561 ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat
4621 ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga cttatcgcca ctggcagcag
4681 ccactggtaa caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt
4741 ggtggcctaa ctacggctac actagaagga cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc
4801 cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg caaacaaacc accgctggta
4861 gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag
4921 atcctttgat cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga
4981 ttttggtcat gagattatca aaaaggatct tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa
5041 gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa
5101 tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt gcctgactgc
5161 ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga
5221 taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag ccagccggaa
5281 gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct attaattgtt
5341 gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg
5401 ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc
5461 aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgaaa aaaagcggtt agctccttcg
5521 gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag
5581 cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt
5641 actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt
5701 caatacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac
5761 gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac
5821 ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag
5881 caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa
5941 tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat tgtctcatga
6001 gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc
6061 cccgaaaagt gccacctggg tccttttcat cacgtgctat aaaaataatt ataatttaaa
6121 ttttttaata taaatatata aattaaaaat agaaagtaaa aaaagaaatt aaagaaaaaa
6181 tagtttttgt tttccgaaga tgtaaaagac tctaggggga tcgccaacaa atactacctt
6241 ttatcttgct cttcctgctc tcaggtatta atgccgaatt gtttcatctt gtctgtgtag
6301 aagaccacac acgaaaatcc tgtgatttta cattttactt atcgttaatc gaatgtatat
6361 ctatttaatc tgcttttctt gtctaataaa tatatatgta aagtacgctt tttgttgaaa
6421 ttttttaaac ctttgtttat ttttttttct tcattccgta actcttctac cttctttatt
6481 tactttctaa aatccaaata caaaacataa aaataaataa acacagagta aattcccaaa
6541 ttattccatc attaaaagat acgaggcgcg tgtaagttac aggcaagcga tccgtcctaa
6601 gaaaccatta ttatcatgac attaacctat aaaaataggc gtatcacgag gccctttcgt
6661 c
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pRS315-TEF-CYC1酿酒酵母质粒
别称: pRS315-TEF-CYC1
| 原核抗性: | Amp |
|---|---|
| 筛选标记: | LEU2 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 酵母菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | LEU2 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pRS315-TEF-CYC1酿酒酵母质粒
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6661 bp ds-DNA circular SYN 05-JUL-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pRS315-TEF-CYC1
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6661)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6661
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS complement(663..1757)
/codon_start=1
/gene="S. cerevisiae LEU2"
/product="3-isopropylmalate dehydrogenase, required for
leucine biosynthesis"
/note="LEU2"
/note="yeast auxotrophic marker"
/translation="MSAPKKIVVLPGDHVGQEITAEAIKVLKAISDVRSNVKFDFENHL
IGGAAIDATGVPLPDEALEASKKVDAVLLGAVGGPKWGTGSVRPEQGLLKIRKELQLYA
NLRPCNFASDSLLDLSPIKPQFAKGTDFVVVRELVGGIYFGKRKEDDGDGVAWDSEQYT
VPEVQRITRMAAFMALQHEPPLPIWSLDKANVLASSRLWRKTVEETIKNEFPTLKVQHQ
LIDSAAMILVKNPTHLNGIIITSNMFGDIISDEASVIPGSLGLLPSASLASLPDKNTAF
GLYEPCHGSAPDLPKNKVDPIATILSAAMMLKLSLNLPEEGKAIEDAVKKVLDAGIRTG
DLGGSNSTTEVGDAVAEEVKKILA"
promoter complement(1770..2174)
/gene="S. cerevisiae LEU2"
/note="LEU2 promoter"
rep_origin complement(2474..2929)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 3097..3115
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 3130..3528
/gene="S. cerevisiae TEF1"
/note="TEF1 promoter"
/note="promoter for EF-1-alpha"
misc_feature 3544..3614
/note="MCS"
terminator 3615..3862
/gene="S. cerevisiae CYC1"
/note="CYC1 terminator"
/note="transcription terminator for CYC1"
rep_origin complement(4328..4916)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5087..5947)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin,
and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFFHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5948..6052)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
misc_feature 6089..6592
/note="CEN/ARS"
/note="S. cerevisiae CEN6 centromere fused to an
autonomously replicating sequence"
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatcga ctacgtcgta aggccgtttc tgacagagta aaattcttga gggaactttc
241 accattatgg gaaatggttc aagaaggtat tgacttaaac tccatcaaat ggtcaggtca
301 ttgagtgttt tttatttgtt gtattttttt ttttttagag aaaatcctcc aatatcaaat
361 taggaatcgt agtttcatga ttttctgtta cacctaactt tttgtgtggt gccctcctcc
421 ttgtcaatat taatgttaaa gtgcaattct ttttccttat cacgttgagc cattagtatc
481 aatttgctta cctgtattcc tttactatcc tcctttttct ccttcttgat aaatgtatgt
541 agattgcgta tatagtttcg tctaccctat gaacatattc cattttgtaa tttcgtgtcg
601 tttctattat gaatttcatt tataaagttt atgtacaaat atcataaaaa aagagaatct
661 ttttaagcaa ggattttctt aacttcttcg gcgacagcat caccgacttc ggtggtactg
721 ttggaaccac ctaaatcacc agttctgata cctgcatcca aaaccttttt aactgcatct
781 tcaatggcct taccttcttc aggcaagttc aatgacaatt tcaacatcat tgcagcagac
841 aagatagtgg cgatagggtc aaccttattc tttggcaaat ctggagcaga accgtggcat
901 ggttcgtaca aaccaaatgc ggtgttcttg tctggcaaag aggccaagga cgcagatggc
961 aacaaaccca aggaacctgg gataacggag gcttcatcgg agatgatatc accaaacatg
1021 ttgctggtga ttataatacc atttaggtgg gttgggttct taactaggat catggcggca
1081 gaatcaatca attgatgttg aaccttcaat gtagggaatt cgttcttgat ggtttcctcc
1141 acagtttttc tccataatct tgaagaggcc aaaacattag ctttatccaa ggaccaaata
1201 ggcaatggtg gctcatgttg tagggccatg aaagcggcca ttcttgtgat tctttgcact
1261 tctggaacgg tgtattgttc actatcccaa gcgacaccat caccatcgtc ttcctttctc
1321 ttaccaaagt aaatacctcc cactaattct ctgacaacaa cgaagtcagt acctttagca
1381 aattgtggct tgattggaga taagtctaaa agagagtcgg atgcaaagtt acatggtctt
1441 aagttggcgt acaattgaag ttctttacgg atttttagta aaccttgttc aggtctaaca
1501 ctaccggtac cccatttagg accacccaca gcacctaaca aaacggcatc aaccttcttg
1561 gaggcttcca gcgcctcatc tggaagtggg acacctgtag catcgatagc agcaccacca
1621 attaaatgat tttcgaaatc gaacttgaca ttggaacgaa catcagaaat agctttaaga
1681 accttaatgg cttcggctgt gatttcttga ccaacgtggt cacctggcaa aacgacgatc
1741 ttcttagggg cagacatagg ggcagacatt agaatggtat atccttgaaa tatatatata
1801 tattgctgaa atgtaaaagg taagaaaagt tagaaagtaa gacgattgct aaccacctat
1861 tggaaaaaac aataggtcct taaataatat tgtcaacttc aagtattgtg atgcaagcat
1921 ttagtcatga acgcttctct attctatatg aaaagccggt tccggcctct cacctttcct
1981 ttttctccca atttttcagt tgaaaaaggt atatgcgtca ggcgacctct gaaattaaca
2041 aaaaatttcc agtcatcgaa tttgattctg tgcgatagcg cccctgtgtg ttctcgttat
2101 gttgaggaaa aaaataatgg ttgctaagag attcgaactc ttgcatctta cgatacctga
2161 gtattcccac agttaactgc ggtcaagata tttcttgaat caggcgcctt agaccgctcg
2221 gccaaacaac caattacttg ttgagaaata gagtataatt atcctataaa tataacgttt
2281 ttgaacacac atgaacaagg aagtacagga caattgattt tgaagagaat gtggattttg
2341 atgtaattgt tgggattcca tttttaataa ggcaataata ttaggtatgt ggatatacta
2401 gaagttctcc tcgagggtcg atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa
2461 ataccgcatc aggaaattgt aaacgttaat attttgttaa aattcgcgtt aaatttttgt
2521 taaatcagct cattttttaa ccaataggcc gaaatcggca aaatccctta taaatcaaaa
2581 gaatagaccg agatagggtt gagtgttgtt ccagtttgga acaagagtcc actattaaag
2641 aacgtggact ccaacgtcaa agggcgaaaa accgtctatc agggcgatgg cccactacgt
2701 gaaccatcac cctaatcaag ttttttgggg tcgaggtgcc gtaaagcact aaatcggaac
2761 cctaaaggga gcccccgatt tagagcttga cggggaaagc cggcgaacgt ggcgagaaag
2821 gaagggaaga aagcgaaagg agcgggcgct agggcgctgg caagtgtagc ggtcacgctg
2881 cgcgtaacca ccacacccgc cgcgcttaat gcgccgctac agggcgcgtc gcgccattcg
2941 ccattcaggc tgcgcaactg ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc gctattacgc
3001 cagctggcga aggggggatg tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc agggttttcc
3061 cagtcacgac gttgtaaaac gacggccagt gaattgtaat acgactcact atagggcgaa
3121 ttggagctcc atagcttcaa aatgtttcta ctcctttttt actcttccag attttctcgg
3181 actccgcgca tcgccgtacc acttcaaaac acccaagcac agcatactaa atttcccctc
3241 tttcttcctc tagggtgtcg ttaattaccc gtactaaagg tttggaaaag aaaaaagaga
3301 ccgcctcgtt tctttttctt cgtcgaaaaa ggcaataaaa atttttatca cgtttctttt
3361 tcttgaaaat tttttttttg atttttttct ctttcgatga cctcccattg atatttaagt
3421 taataaacgg tcttcaattt ctcaagtttc agtttcattt ttcttgttct attacaactt
3481 tttttacttc ttgctcatta gaaagaaagc atagcaatct aatctaagtt ttctagaact
3541 agcgcggccg ctctagaact agtggatccc ccgggctgca ggaattcgat atcaagctta
3601 tcgataccgt cgactcatgt aattagttat gtcacgctta cattcacgcc ctccccccac
3661 atccgctcta accgaaaagg aaggagttag acaacctgaa gtctaggtcc ctatttattt
3721 ttttatagtt atgttagtat taagaacgtt atttatattt caaatttttc ttttttttct
3781 gtacagacgc gtgtacgcat gtaacattat actgaaaacc ttgcttgaga aggttttggg
3841 acgctcgaag gctttaattt gcgggcccgg tacccagctt ttgttccctt tagtgagggt
3901 taattccgag cttggcgtaa tcatggtcat agctgtttcc tgtgtgaaat tgttatccgc
3961 tcacaattcc acacaacata ggagccggaa gcataaagtg taaagcctgg ggtgcctaat
4021 gagtgaggta actcacatta attgcgttgc gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc
4081 tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg
4141 ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag
4201 cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac agaatcaggg gataacgcag
4261 gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc
4321 tggcgttttt ccataggctc ggcccccctg acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc
4381 agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa gataccaggc gttcccccct ggaagctccc
4441 tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt
4501 cgggaagcgt ggcgctttct caatgctcac gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg
4561 ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat
4621 ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga cttatcgcca ctggcagcag
4681 ccactggtaa caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt
4741 ggtggcctaa ctacggctac actagaagga cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc
4801 cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg caaacaaacc accgctggta
4861 gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag
4921 atcctttgat cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga
4981 ttttggtcat gagattatca aaaaggatct tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa
5041 gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa
5101 tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt gcctgactgc
5161 ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga
5221 taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag ccagccggaa
5281 gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct attaattgtt
5341 gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg
5401 ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc
5461 aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgaaa aaaagcggtt agctccttcg
5521 gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag
5581 cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt
5641 actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt
5701 caatacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac
5761 gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac
5821 ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag
5881 caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa
5941 tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat tgtctcatga
6001 gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc
6061 cccgaaaagt gccacctggg tccttttcat cacgtgctat aaaaataatt ataatttaaa
6121 ttttttaata taaatatata aattaaaaat agaaagtaaa aaaagaaatt aaagaaaaaa
6181 tagtttttgt tttccgaaga tgtaaaagac tctaggggga tcgccaacaa atactacctt
6241 ttatcttgct cttcctgctc tcaggtatta atgccgaatt gtttcatctt gtctgtgtag
6301 aagaccacac acgaaaatcc tgtgatttta cattttactt atcgttaatc gaatgtatat
6361 ctatttaatc tgcttttctt gtctaataaa tatatatgta aagtacgctt tttgttgaaa
6421 ttttttaaac ctttgtttat ttttttttct tcattccgta actcttctac cttctttatt
6481 tactttctaa aatccaaata caaaacataa aaataaataa acacagagta aattcccaaa
6541 ttattccatc attaaaagat acgaggcgcg tgtaagttac aggcaagcga tccgtcctaa
6601 gaaaccatta ttatcatgac attaacctat aaaaataggc gtatcacgag gccctttcgt
6661 c
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1977/pENTR223-ZC3HC1人源基因质粒 |
| P1978/pENTR223-HMGB1人源基因质粒 |
| P1979/pENTR223-TC-P10L人源基因质粒 |
| P1980/pENTR223-MOB3C人源基因质粒 |
| P1981/pENTR223-RAB11A-C8T人源基因质粒 |
| P1982/pENTR223-C19orf36人源基因质粒 |
| P1983/pENTR223-MS4A3人源基因质粒 |
| P1984/pENTR223-TIA1人源基因质粒 |
| P1985/pENTR223-PLA2G4D人源基因质粒 |
| P1986/pENTR223-COMMD10-C14人源基因质粒 |
| P1987/pENTR223-RILPL2人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
pYES2.0 酵母质粒 Amp 酿酒酵母载体 pRS403 酵母质粒 pRS423 酵母质粒 pRC426gal 酵母质粒
pRS315-TEF-CYC1酿酒酵母质粒
￥100 - 1000
