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- Xybio
- 上海
- P0660
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pROKII-RNAI
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pROKII-RNAI植物干扰质粒
别称: pROKII-RNAI
| 启动子: | 35s |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | NOS |
| 质粒分类: | 植物系列，RNAi载体 |
| 质粒大小: | 12880bp |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 植物细胞 |
| 5'测序引物: | 35S:GACGCACAATCCCACTATCC |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 植物 |
|---|---|
| 载体用途： | 干扰沉默 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | shRNA |
| 原核抗性： | Kan |
| 筛选标记： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
siRNA) caused by RNA (interference RNA short)Interference (RNAi) is a very effective test method. It is a creature The body of a molecule by double stranded RNA (dsRNA) molecules to make specific Degradation of the sequence of mRNA resulted in the silencing of gene expression. This phenomenon occurs at the post transcriptional level, that is, sequence specific Post transcriptional gene silencing
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P0113/pLentiCRISPR 哺乳编辑质粒 |
| P0114/pLentiCRISPR V2哺乳编辑质粒 |
| P0889/pLentiCRISPR-E哺乳编辑质粒 |
| P1289/LentiCRISPRV2GFP哺乳编辑质粒 |
| P0115/pLentiGuide-Puro哺乳编辑质粒 |
| P0805/pLentiCas9-Blast哺乳编辑质粒 |
| P0117/lenti dCAS-VP64_Blast哺乳编辑质粒 |
| P1595/Lenti-dCas9-KRAB-blast哺乳编辑质粒 |
| P0118/pCDNA-dCas9-VP64哺乳编辑质粒 |
| P0124/pLX-sgRNA哺乳编辑质粒 |
| P1596/pUC57-sgRNA哺乳编辑质粒 |
| P0340/pCRISPR-mCherry-Neo哺乳编辑质粒 |
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文献和实验RNA沉默是广泛存在于生物中的一种古老现象，是生物抵抗异常DNA的一种保护机制,同时在生物生长发育过程中扮演着基因表达调控的角色。文章对RNA沉默研究中的几个热点问题进行了介绍，按RNA沉默持续时间的不同对其在植物中应用的方法进行了分析，并重点论述了RNA沉默在植物功能基因组研究、作物品质改良以及抗病毒植物培育等方面的应用及其发展前景。RNA沉默(RNAsilencing)是一种结合和降解特异mRNA序列的形式,其发现可追溯到1990年，Napoli等]向矮牵牛中导入更多拷贝与粉红色色素合成
RNAi即RNA干涉(或RNA干扰)是指双链RNA导入细胞后并被切割成21～23个核苷酸长度的短核苷酸双链，在其它作用因子的参与下能够特异地与其同源的mRNA结合并导致其降解，从而使得内源基因不能表达，导致内源基因的沉默。自1998年Fire等首次在线虫中发现并阐明以来，RNAi已经在其它动物、植物和真菌中被证实。研究表明参与该过程的许多基因具有高度的保守性，这可能是 生物 调控基因表达及抵御病毒侵染或转座子诱导DNA突变的一种
摘要 RNAi技术是研究基因功能的重要工具。其原理是对某个已知基因，设计诱导其沉默的dsRNA，通过合适手段导入细胞或机体使产生干涉效应的信号分子siRNA，导致基因表达水平下降或完全沉默。通过基因表型变化，鉴定该基因功能。从RNAi的研究背景和作用机制出发，对近年来利用RNAi技术研究植物基因功能的概况、诱导方法和载体作一综述。关键词 基因沉默；RNAi技术；植物基因功能 1 RANi的研究背景 1998年，Fire等[1]发现，过去利用正反
