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- 2025年07月15日
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- 文献和实验
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- 英文名：
N
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- 供应商：
无锡云萃生物
- CAS号：
887588-11-6
- 规格：
10mg/50mg/100mg
| 规格： | 10mg | 产品价格： | ￥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50mg | 产品价格： | ￥100.0 |
| 规格： | 100mg | 产品价格： | ￥100.0 |
云萃
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文献和实验mM咪唑）悬浮，100ml用5~10ml缓冲液（约当2~5ml每克菌量），视悬浮后的菌液浓度而定；5、反复冻融法破碎细胞：做到14步时由于时间原因不能立即继续后面的操作，可将菌悬液放于-70℃冰箱中冷冻；也可用反复冻融的方法来破碎细胞，在-70℃冻融，在室温下溶解，反复冻融3~4次；6、加Lysozyme至1mg/ml（1ml加10ul），在冰上孵育30min~1h；7、200~300W超声破碎，2s×30次，停顿2s；若菌种较多可以增加破碎次数。注意超声破碎时间，不可太长，否则温度升高易导致蛋白
；可增强大肠杆菌中的表达水平。硫氧还蛋白尽管其尺寸很小（11kDa），但硫氧还蛋白作为促溶标签非常有效（与所有增溶标签一样，溶解度不一定意味着功能性折叠，并且融合蛋白可能在其标签被切割时发生沉淀）。硫氧还蛋白有个独特的性质，就是耐高温，在高达 80°C 的温度下稳定，并且可以赋予其融合伴侣一定的热稳定性。这样，细胞蛋白可以经热变性处理而不影响融合蛋白。纯化可以使用苯基胂氧化物树脂或抗体共轭树脂来实现。V5来源于副粘病毒 SV5 的 P / V 蛋白的 95 - 108 位氨
2.9 10ml 1*Wash Buffer洗柱子(收集洗脱液10管，流速在0.3-0.4ml/min左右) 2.10 5ml 1* Elution Buffer洗柱子(收集洗脱液5管) 2.11 用15ml 0.5m NaoH清洗，时间约0.5-1h(0.5ml/min) 2.12 用20%乙醇清洗，约0.5-1h(0.5ml/min) 2.13 封好加样口，柱子存放4℃备用 洗脱液-80保藏 试剂配方： 10×NI
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