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无锡云萃生物
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| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
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云萃
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文献和实验氨基末端分析 amino-terminal analysis
组成蛋白质基本结构的多肽链两端,原则上是一端有一个氨基末端残基,另一端带有一个羧基末端残基。前者是将α氨基保持游离状态的氨基酸残基,后者是将α羧基保持游离状态的氨基酸残基。采用 1-氟 -2, 4-二硝基苯的桑格( F. Sanger)的 DNP法( DNP method),在历史上是很著名的。该法可作为鉴定或定量分析位于氨基末端的氨基酸残基的方法。也广泛采用将 DNP法超微量化的 dansyl法(用 5-二甲氨基萘磺酰氯)。 Edman降解法是从氨基末端开始测定氨基酸排列
问:请教我现在测定氨基酸(只是打算测定其中的天门冬氨酸和谷氨酸以及丙氨酸三种氨基酸):现用岛津液相,LC-10AT的泵和SPD-10A的检测器,色谱柱ods C18柱(250 X 4.6mm),检测波长254nm,柱温40cc,流速lmL·min~,流动相A:0.1mol·L- ,醋酸钠溶液(pH6.5)一乙腈(93:7),流动相B:乙腈一水(8o:20),并按下述进行梯度洗脱。线性梯度洗脱程序:0.0 min,0%B;13 min,7% B;23 min。23% B;29 min,35% B
0.1%中性红50%乙醇溶液。 ④O.1mol·L-1氢氧化钠标准溶液,标定后使用。 3.操作步骤 移取含氨基酸约20~30 mg的样品溶液2份,分别置于250 mL锥形瓶中,各加50 mL蒸馏水,其中1份加人3滴中性红指示剂,用O.1mol·L-1氢氧化钠标准溶液滴定至由红变为琥珀色为终点;另1份加入3滴百里酚酞指示剂及中性甲醛20 mL,摇匀,静置1 min,用O.1mol·L-1,氢氧化钠标准溶液滴定至淡蓝色为终点。分别记录两次所消耗的碱液体积。 4.
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