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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
pFUSE-mIgG1-Fc2
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pFUSE-mIgG1-Fc2哺乳抗体质粒
别称: pFUSE-mIgG1-Fc2
| 复制子: | pUC |
|---|---|
| 原核抗性: | Zeo |
| 筛选标记: | Zeo |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主: | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途: | 蛋白表达,抗体表达 |
| 基因种属: | 空载体 |
| 基因类型: | ORF |
| 原核抗性: | Zeo |
| 真核抗性: | Zeo |
| 荧光蛋白: |
质粒简介
pFUSE-mIgG1-Fc2质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P3036/pENTR223-PLAT(1点突变)人源基因质粒 |
| P3037/pENTR223-ETFDH-C92T人源基因质粒 |
| P3038/pENTR223-ALDH1B1人源基因质粒 |
| P3039/pENTR223-ZZZ3-G15人源基因质粒 |
| P3040/pENTR223-CAMKV人源基因质粒 |
| P3041/pENTR223-PPP2R1A人源基因质粒 |
| P3042/pENTR223-SARS人源基因质粒 |
| P3043/pENTR223-CHAF1B人源基因质粒 |
| P3044/pENTR223-IMAGE4120678人源基因质粒 |
| P3045/pENTR223-FAM71A人源基因质粒 |
| P3046/pENTR223-CBFA2T2人源基因质粒 |
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文献和实验rop基因的质粒在拷贝数上的表现却不尽相同,这是由于pUC质粒在RNAII序列上带有一个G到A的点突变,可依温度的不同而改变正向调节分子RNAII的二级结构,Chambers S &Yanisch-Perron C等研究表明在42℃或者45℃下,RNAII似乎折叠成抗RNAI抑制的构型,于是DNA合成的起始加强,结果拷贝数特别高[12-14]。 尽管构建DNA疫苗时普遍使用ColE1类型复制子,但Uhlin B & Remaut E报道的一种由低拷贝发展而来的由温度控制的“失控型”复制子同样具有
化剂及苯胺等间接氧化剂敏感,易产生高铁血红蛋白症及紫绀。 (4)芳烃羟化酶(AHH)诱导力增高症:AAH活性高者患支气管肺癌的危险性也高。 (5)N-乙酰基转移酶缺乏症:可增加接触β-萘胺、联苯胺、4-氨基联苯、4-硝基联苯等致癌原者患膀胱癌的相对危险性。 (6)镰状红细胞体质者:可增加接触硝基化合物、氨基化合物、苯、铅、镉、氰化物及一氧化碳等环境因素的敏感性。 二、环境危害因素的类型与健康的关系 环境危害因素分物理性、化学
,发生肺气肿等慢性阻塞性肺部疾患的危险性大。 (3)高铁血红蛋白还原酶缺乏症:对亚硝酸盐等直接氧化剂及苯胺等间接氧化剂敏感,易产生高铁血红蛋白症及紫绀。 (4)芳烃羟化酶(AHH)诱导力增高症:AAH活性高者患支气管肺癌的危险性也高。 (5)N-乙酰基转移酶缺乏症:可增加接触β-萘胺、联苯胺、4-氨基联苯、4-硝基联苯等致癌原者患膀胱癌的相对危险性。 (6)镰状红细胞体质者:可增加接触硝基化合物、氨基化合物、苯、铅、镉、氰化物及一氧化碳











