2-溴-5-三氟甲巯基吡啶,1204234-94-5

western blot详解，多年积累加上经验总结，觉得好就顶一下

水部分相结合,破坏其折叠结构,电泳样品假如样品缓冲液后,要在沸水中煮3-5分钟使SDS与蛋白质充分结合形成SDS-蛋白质复合物,SDS-蛋白质复合物在强还原剂巯基乙醇存在时,蛋白质分子内的二硫键被打开而不被氧化,蛋白质也完全变性和解聚,并形成榛状结构,稳定的存在于均一的溶液中,SDS与蛋白质结合后使SDS-蛋白质复合物上带有大量的负电荷,平均每两个氨基酸残基结合一个SDS分子,这时各种蛋白质分子本身的电荷完全被SDS掩盖,远远超过其原来所带的电荷,从而使蛋白质原来所带的电荷可以忽略不计,消除了不同分子之间原有

用SDS―聚丙烯酰凝胶电泳法测定蛋白质的分子量

相关专题   一、原理 SDS 是一种阴离子表面激活剂，在蛋白质溶液里加入 SDS 和巯基乙醇后，巯基乙醇能使蛋白质分子中的二硫键还原； SDS 能使蛋白质的氢键、疏水键打开并结合到蛋白质分子上，形成蛋白质 -SDS 复合物。在一定条件下，SDS 与大多数蛋白质的结合比例为 1.4g SDS/1g 蛋白质。由于十二烷基硫酸根带负电，使各种蛋白质的 SDS- 复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质原有的电荷量，因而掩盖

WESTERN BLOT PROTOCOLS

(1%)共20µl 3、取标准品18微升，加2µl Triton-100(1%)共20µl 4、取样品5µl,加2µl Tritonx-100(1%)，加水补足到20µl 4、向各管中加1ml考马斯兰，混匀，2-5min，测定波长595nm的光吸收值A595 5、用标准蛋白量浓度为横坐标，A595值为纵坐标，作图 6、测样品(3.6倍) 注：测蛋白标准品时由低浓度开始向高浓度测量 Westen Blot 溶液