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- Xybio
- 上海
- P1873
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pAmCyan1-N1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pAmCyan1-N1哺乳荧光质粒
别称: pAmCyan1-N1
| 原核抗性: | Kan |
|---|---|
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
pAmCyan1-N1质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2779/pENTR223-ATP6V1C1-G3T人源基因质粒 |
| P2780/pENTR223-RCL1人源基因质粒 |
| P2781/pENTR223-THUMPD1人源基因质粒 |
| P2782/pENTR223-AFF4（1-1087bp）人源基因质粒 |
| P2783/pENTR223-RPF1-A25G人源基因质粒 |
| P2784/pENTR223-ARHGAP29（1-1145bp）人源基因质粒 |
| P2785/pENTR223-PCYT2人源基因质粒 |
| P2786/pENTR223-PPID（倒数第20碱基A缺失）人源基因质粒 |
| P2787/pENTR223-SURF6人源基因质粒 |
| P2788/pENTR223-PSMD4人源基因质粒 |
| P2789/pENTR223-DAZAP2人源基因质粒 |
| P2790/pENTR223-MUL1（3点突变）人源基因质粒 |
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文献和实验选用简并程度低的密码子, 例如选用只有一种密码子的Met, 3'端应不存在简并性。否则可能由于产量低而看不见扩增产物.现已成功地克隆了猪尿酸氧化酶基因、糖尿病相关肽基因和哺乳动物与禽类的嗜肝病毒基因。用脱氧肌苷(deoxyinosine;DI)引物进行PCR ，可以代替编码蛋白的多种简并密码子中的简并碱基，DI的特异性主要受cDNA浓度影响。 简并引物的设计： 简并引物是根据某些特定的目的而选用的一组混合物，指在寡核甘酸的某一位置(一个简并位)上有多个碱基存在
图腾，图中心的红色生殖细胞则是传递遗传信息的关键。首次建立原始生殖细胞基因表达的表观遗传调控坐标，为哺乳动物生殖细胞表观遗传重编程及 DNA 甲基化隔代遗传等提供了理论依据。主页链接http://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(15)00563-208 中西合璧看到这张《The Lancet Gastroenterology & Hepatology》的封面，巧妙地将中式龙与英式龙衔接，绘制相应的病菌分布及表现体征。主页链接http://www
导致这次墨西哥和美国等发生疫情的病毒为Ａ型流感病毒，Ｈ１Ｎ１亚型猪流感病毒毒株，该毒株包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片断，是一种新型猪流感病毒，可以人传染人。 世卫组织多次表明，虽然这种新型病毒是由猪流感病毒演变而来，但到目前为止这种病毒只是使人患病，还没有发现猪被感染的病例。 流感病毒有三种类型：甲型（A型）流感病毒感染哺乳动物以及鸟类；乙型（B型）流感病毒只感染人类，疾病的产生通常较甲型病毒温和；丙型（C型）流感病毒只感染人类，并不会引起严重的疾病
