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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 技术资料
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2年
- 英文名：
pIRES2-DsRed2
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pIRES2-DsRed2哺乳荧光质粒
别称: pIRES2-DsRed2
质粒属性
质粒简介
pIRES2-DsRed2质粒是一个哺乳细胞红色荧光蛋白过表达载体，通过IRES2的作用，使得目的基因和DsRed2红色荧光蛋白在同一个启动子的作用下翻译，但并不形成融合蛋白。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5264 bp ds-DNA circular SYN 22-10-2015
KEYWORDS Untitled 2
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5264)
AUTHORS admin
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5264
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
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/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 365..568
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
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/note="MCS"
/note="multiple cloning site"
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/note="IRES2"
/note="internal ribosome entry site (IRES) of the
encephalomyocarditis virus (EMCV)"
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protein"
/note="DsRed2"
/note="mammalian codon-optimized"
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LKVTKGGPLPFAWDILSPQFQYGSKVYVKHPADIPDYKKLSFPEGFKWERVMNFEDGGV
ATVTQDSSLQDGCFIYKVKFIGVNFPSDGPVMQKKTMGWEASTERLYPRDGVLKGETHK
ALKLKDGGHYLVEFKSIYMAKKPVQLPGYYYVDAKLDITSHNEDYTIVEQYERTEGRHH
LFL"
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/note="f1 ori"
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indicates direction of (+) strand synthesis"
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/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
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/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
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(Geneticin(R))"
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GLAPAELFARLKASMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
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replication"
ORIGIN
1 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg
61 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt
121 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca
181 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc
241 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta
301 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac
361 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg
421 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg
481 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt
541 acggtgggag gtctatataa gcagagctgg tttagtgaac cgtcagatcc gctagcgcta
601 ccggactcag atctcgagct caagcttcga attctgcagt cgacggtacc gcgggcccgg
661 gatccgcccc tctccctccc ccccccctaa cgttactggc cgaagccgct tggaataagg
721 ccggtgtgcg tttgtctata tgttattttc caccatattg ccgtcttttg gcaatgtgag
781 ggcccggaaa cctggccctg tcttcttgac gagcattcct aggggtcttt cccctctcgc
841 caaaggaatg caaggtctgt tgaatgtcgt gaaggaagca gttcctctgg aagcttcttg
901 aagacaaaca acgtctgtag cgaccctttg caggcagcgg aaccccccac ctggcgacag
961 gtgcctctgc ggccaaaagc cacgtgtata agatacacct gcaaaggcgg cacaacccca
1021 gtgccacgtt gtgagttgga tagttgtgga aagagtcaaa tggctctcct caagcgtatt
1081 caacaagggg ctgaaggatg cccagaaggt accccattgt atgggatctg atctggggcc
1141 tcggtgcaca tgctttacat gtgtttagtc gaggttaaaa aaacgtctag gccccccgaa
1201 ccacggggac gtggttttcc tttgaaaaac acgatgataa tatggccaca accatggcct
1261 cctccgagaa cgtcatcacc gagttcatgc gcttcaaggt gcgcatggag ggcaccgtga
1321 acggccacga gttcgagatc gagggcgagg gcgagggccg cccctacgag ggccacaaca
1381 ccgtgaagct gaaggtgacc aagggcggcc ccctgccctt cgcctgggac atcctgtccc
1441 cccagttcca gtacggctcc aaggtgtacg tgaagcaccc cgccgacatc cccgactaca
1501 agaagctgtc cttccccgag ggcttcaagt gggagcgcgt gatgaacttc gaggacggcg
1561 gcgtggcgac cgtgacccag gactcctccc tgcaggacgg ctgcttcatc tacaaggtga
1621 agttcatcgg cgtgaacttc ccctccgacg gccccgtgat gcagaagaag accatgggct
1681 gggaggcctc caccgagcgc ctgtaccccc gcgacggcgt gctgaagggc gagacccaca
1741 aggccctgaa gctgaaggac ggcggccact acctggtgga gttcaagtct atctacatgg
1801 ccaagaagcc cgtgcagctg cccggctact actacgtgga cgccaagctg gacatcacct
1861 cccacaacga ggactacacc atcgtggagc agtacgagcg caccgagggc cgccaccacc
1921 tgttcctgta gcggccgcga ctctagatca taatcagcca taccacattt gtagaggttt
1981 tacttgcttt aaaaaacctc ccacacctcc ccctgaacct gaaacataaa atgaatgcaa
2041 ttgttgttgt taacttgttt attgcagctt ataatggtta caaataaagc aatagcatca
2101 caaatttcac aaataaagca tttttttcac tgcattctag ttgtggtttg tccaaactca
2161 tcaatgtatc ttaaggcgta aattgtaagc gttaatattt tgttaaaatt cgcgttaaat
2221 ttttgttaaa tcagctcatt ttttaaccaa taggccgaaa tcggcaaaat cccttataaa
2281 tcaaaagaat agaccgagat agggttgagt gttgttccag tttggaacaa gagtccacta
2341 ttaaagaacg tggactccaa cgtcaaaggg cgaaaaaccg tctatcaggg cgatggccca
2401 ctacgtgaac catcacccta atcaagtttt ttggggtcga ggtgccgtaa agcactaaat
2461 cggaacccta aagggagccc ccgatttaga gcttgacggg gaaagccggc gaacgtggcg
2521 agaaaggaag ggaagaaagc gaaaggagcg ggcgctaggg cgctggcaag tgtagcggtc
2581 acgctgcgcg taaccaccac acccgccgcg cttaatgcgc cgctacaggg cgcgtcaggt
2641 ggcacttttc ggggaaatgt gcgcggaacc cctatttgtt tatttttcta aatacattca
2701 aatatgtatc cgctcatgag acaataaccc tgataaatgc ttcaataata ttgaaaaagg
2761 aagagtcctg aggcggaaag aaccagctgt ggaatgtgtg tcagttaggg tgtggaaagt
2821 ccccaggctc cccagcaggc agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca
2881 ggtgtggaaa gtccccaggc tccccagcag gcagaagtat gcaaagcatg catctcaatt
2941 agtcagcaac catagtcccg cccctaactc cgcccatccc gcccctaact ccgcccagtt
3001 ccgcccattc tccgccccat ggctgactaa ttttttttat ttatgcagag gccgaggccg
3061 cctcggcctc tgagctattc cagaagtagt gaggaggctt ttttggaggc ctaggctttt
3121 gcaaagatcg atcaagagac aggatgagga tcgtttcgca tgattgaaca agatggattg
3181 cacgcaggtt ctccggccgc ttgggtggag aggctattcg gctatgactg ggcacaacag
3241 acaatcggct gctctgatgc cgccgtgttc cggctgtcag cgcaggggcg cccggttctt
3301 tttgtcaaga ccgacctgtc cggtgccctg aatgaactgc aagacgaggc agcgcggcta
3361 tcgtggctgg ccacgacggg cgttccttgc gcagctgtgc tcgacgttgt cactgaagcg
3421 ggaagggact ggctgctatt gggcgaagtg ccggggcagg atctcctgtc atctcacctt
3481 gctcctgccg agaaagtatc catcatggct gatgcaatgc ggcggctgca tacgcttgat
3541 ccggctacct gcccattcga ccaccaagcg aaacatcgca tcgagcgagc acgtactcgg
3601 atggaagccg gtcttgtcga tcaggatgat ctggacgaag agcatcaggg gctcgcgcca
3661 gccgaactgt tcgccaggct caaggcgagc atgcccgacg gcgaggatct cgtcgtgacc
3721 catggcgatg cctgcttgcc gaatatcatg gtggaaaatg gccgcttttc tggattcatc
3781 gactgtggcc ggctgggtgt ggcggaccgc tatcaggaca tagcgttggc tacccgtgat
3841 attgctgaag agcttggcgg cgaatgggct gaccgcttcc tcgtgcttta cggtatcgcc
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5221 cgttatcccc tgattctgtg gataaccgta ttaccgccat gcat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pIRES2-DsRed2哺乳荧光质粒
别称: pIRES2-DsRed2
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly A |
| 质粒大小: | 5264bp |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： | 红色 |
质粒简介
pIRES2-DsRed2质粒是一个哺乳细胞红色荧光蛋白过表达载体，通过IRES2的作用，使得目的基因和DsRed2红色荧光蛋白在同一个启动子的作用下翻译，但并不形成融合蛋白。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5264 bp ds-DNA circular SYN 22-10-2015
KEYWORDS Untitled 2
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5264)
AUTHORS admin
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5264
/organism="synthetic DNA construct"
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promoter"
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replication"
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121 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca
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3061 cctcggcctc tgagctattc cagaagtagt gaggaggctt ttttggaggc ctaggctttt
3121 gcaaagatcg atcaagagac aggatgagga tcgtttcgca tgattgaaca agatggattg
3181 cacgcaggtt ctccggccgc ttgggtggag aggctattcg gctatgactg ggcacaacag
3241 acaatcggct gctctgatgc cgccgtgttc cggctgtcag cgcaggggcg cccggttctt
3301 tttgtcaaga ccgacctgtc cggtgccctg aatgaactgc aagacgaggc agcgcggcta
3361 tcgtggctgg ccacgacggg cgttccttgc gcagctgtgc tcgacgttgt cactgaagcg
3421 ggaagggact ggctgctatt gggcgaagtg ccggggcagg atctcctgtc atctcacctt
3481 gctcctgccg agaaagtatc catcatggct gatgcaatgc ggcggctgca tacgcttgat
3541 ccggctacct gcccattcga ccaccaagcg aaacatcgca tcgagcgagc acgtactcgg
3601 atggaagccg gtcttgtcga tcaggatgat ctggacgaag agcatcaggg gctcgcgcca
3661 gccgaactgt tcgccaggct caaggcgagc atgcccgacg gcgaggatct cgtcgtgacc
3721 catggcgatg cctgcttgcc gaatatcatg gtggaaaatg gccgcttttc tggattcatc
3781 gactgtggcc ggctgggtgt ggcggaccgc tatcaggaca tagcgttggc tacccgtgat
3841 attgctgaag agcttggcgg cgaatgggct gaccgcttcc tcgtgcttta cggtatcgcc
3901 gctcccgatt cgcagcgcat cgccttctat cgccttcttg acgagttctt ctgagcggga
3961 ctctggggtt cgaaatgacc gaccaagcga cgcccaacct gccatcacga gatttcgatt
4021 ccaccgccgc cttctatgaa aggttgggct tcggaatcgt tttccgggac gccggctgga
4081 tgatcctcca gcgcggggat ctcatgctgg agttcttcgc ccaccctagg gggaggctaa
4141 ctgaaacacg gaaggagaca ataccggaag gaacccgcgc tatgacggca ataaaaagac
4201 agaataaaac gcacggtgtt gggtcgtttg ttcataaacg cggggttcgg tcccagggct
4261 ggcactctgt cgatacccca ccgagacccc attggggcca atacgcccgc gtttcttcct
4321 tttccccacc ccacccccca agttcgggtg aaggcccagg gctcgcagcc aacgtcgggg
4381 cggcaggccc tgccatagcc tcaggttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc
4441 atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc
4501 cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt
4561 cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac
4621 cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct ttttccgaag gtaactggct
4681 tcagcagagc gcagatacca aatactgtcc ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact
4741 tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg
4801 ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag ttaccggata
4861 aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga
4921 cctacaccga actgagatac ctacagcgtg agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag
4981 ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg
5041 agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac
5101 ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag cctatggaaa aacgccagca
5161 acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt gctggccttt tgctcacatg ttctttcctg
5221 cgttatcccc tgattctgtg gataaccgta ttaccgccat gcat
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3097/pENTR223-FANCM人源基因质粒 |
| P3098/pENTR223-C1R-C455T人源基因质粒 |
| P3099/pENTR223-NVL（319-2298bp1同义突变）人源基因质粒 |
| P3100/pENTR223-DBF4（2点突变）人源基因质粒 |
| P3101/pENTR223-GP-CPD1人源基因质粒 |
| P3102/pENTR223-ZNF334（2点突变）人源基因质粒 |
| P3103/pENTR223-KIAA0391（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3104/pENTR223-CCT5（1点突变2同义突变）人源基因质粒 |
| P3105/pENTR223-CSRNP2人源基因质粒 |
| P3106/pENTR223-ZNF559人源基因质粒 |
| P3107/pENTR223-ZNF274-G439A人源基因质粒 |
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