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- 上海
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
pBAD-33
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20
- 规格：
0.5ug
基本信息
名称：pBAD33大肠表达质粒
别称: pBAD-33
质粒属性
质粒简介
pBAD33是一个大肠杆菌pBAD系列表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
OCUS Exported 5352 bp ds-DNA circular SYN 17-9-2015
KEYWORDS Untitled 3
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5352)
AUTHORS admin
TITLE Direct Submission
JJOURNAL Exported 2015-9-17 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5352
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/mol_type="other DNA"
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VLSWREDQRISQAKLLLSTTRMPIATVGRNVGFDDQLYFSRVFKKCTGASPSEFRAGCE
EKVNDVAVKLS"
promoter 1120..1285
/gene="araBAD"
/note="araBAD promoter"
/note="promoter of the L-arabinose operon of E. coli; the
araC regulatory gene is transcribed in the opposite
direction"
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"
/note="MCS"
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
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/gene="Escherichia coli rrnB"
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/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
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/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
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/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
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/note="f1 ori"
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indicates direction of (+) strand synthesis"
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/note="cat promoter"
/note="promoter of the E. coli cat gene"
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/direction=LEFT
/note="p15A ori"
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
ORIGIN
1 atcgatgcat aatgtgcctg tcaaatggac gaagcaggga ttctgcaaac cctatgctac
61 tccgtcaagc cgtcaattgt ctgattcgtt accaattatg acaacttgac ggctacatca
121 ttcacttttt cttcacaacc ggcacggaac tcgctcgggc tggccccggt gcatttttta
181 aatacccgcg agaaatagag ttgatcgtca aaaccaacat tgcgaccgac ggtggcgata
241 ggcatccggg tggtgctcaa aagcagcttc gcctggctga tacgttggtc ctcgcgccag
301 cttaagacgc taatccctaa ctgctggcgg aaaagatgtg acagacgcga cggcgacaag
361 caaacatgct gtgcgacgct ggcgatatca aaattgctgt ctgccaggtg atcgctgatg
421 tactgacaag cctcgcgtac ccgattatcc atcggtggat ggagcgactc gttaatcgct
481 tccatgcgcc gcagtaacaa ttgctcaagc agatttatcg ccagcagctc cgaatagcgc
541 ccttcccctt gcccggcgtt aatgatttgc ccaaacaggt cgctgaaatg cggctggtgc
601 gcttcatccg ggcgaaagaa ccccgtattg gcaaatattg acggccagtt aagccattca
661 tgccagtagg cgcgcggacg aaagtaaacc cactggtgat accattcgcg agcctccgga
721 tgacgaccgt agtgatgaat ctctcctggc gggaacagca aaatatcacc cggtcggcaa
781 acaaattctc gtccctgatt tttcaccacc ccctgaccgc gaatggtgag attgagaata
841 taacctttca ttcccagcgg tcggtcgata aaaaaatcga gataaccgtt ggcctcaatc
901 ggcgttaaac ccgccaccag atgggcatta aacgagtatc ccggcagcag gggatcattt
961 tgcgcttcag ccatactttt catactcccg ccattcagag aagaaaccaa ttgtccatat
1021 tgcatcagac attgccgtca ctgcgtcttt tactggctct tctcgctaac caaaccggta
1081 accccgctta ttaaaagcat tctgtaacaa agcgggacca aagccatgac aaaaacgcgt
1141 aacaaaagtg tctataatca cggcagaaaa gtccacattg attatttgca cggcgtcaca
1201 ctttgctatg ccatagcatt tttatccata agattagcgg atcctacctg acgcttttta
1261 tcgcaactct ctactgtttc tccatacccg tttttttggg ctagcgaatt cgagctcggt
1321 acccggggat cctctagagt cgacctgcag gcatgcaagc ttggctgttt tggcggatga
1381 gagaagattt tcagcctgat acagattaaa tcagaacgca gaagcggtct gataaaacag
1441 aatttgcctg gcggcagtag cgcggtggtc ccacctgacc ccatgccgaa ctcagaagtg
1501 aaacgccgta gcgccgatgg tagtgtgggg tctccccatg cgagagtagg gaactgccag
1561 gcatcaaata aaacgaaagg ctcagtcgaa agactgggcc tttcgtttta tctgttgttt
1621 gtcggtgaac gctctcctga gtaggacaaa tccgccggga gcggatttga acgttgcgaa
1681 gcaacggccc ggagggtggc gggcaggacg cccgccataa actgccaggc atcaaattaa
1741 gcagaaggcc atcctgacgg atggcctttt tgcgtttcta caaactcttt tgtttatttt
1801 tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca tgagacaata accctgataa atgcttcaat
1861 aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc aacatttccg tgtcgccctt attccctttt
1921 ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg
1981 ctgaagatca gttggggcaa actattaact ggcgaactac ttactctagc ttcccggcaa
2041 caattaatag actggatgga ggcggataaa gttgcaggac cacttctgcg ctcggccctt
2101 ccggctggct ggtttattgc tgataaatct ggagccggtg agcgtgggtc tcgcggtatc
2161 attgcagcac tggggccaga tggtaagccc tcccgtatcg tagttatcta cacgacgggg
2221 agtcaggcaa ctatggatga acgaaataga cagatcgctg agataggtgc ctcactgatt
2281 aagcattggt aactgtcaga ccaagtttac tcatatatac tttagattga tttacgcgcc
2341 ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact
2401 tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc
2461 cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt
2521 acggcacctc gaccccaaaa aacttgattt gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc
2581 ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata gtggactctt
2641 gttccaaact tgaacaacac tcaaccctat ctcgggctat tcttttgatt tataagggat
2701 tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa
2761 ttttaacaaa atattaacgt ttacaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata
2821 atctcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag
2881 aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa
2941 caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt
3001 ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt ctagtgtagc
3061 cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa
3121 tcctgttacc agtcaggcat ttgagaagca cacggtcaca ctgcttccgg tagtcaataa
3181 accggtaaac cagcaataga cataagcggc tatttaacga ccctgccctg aaccgacgac
3241 cgggtcgaat ttgctttcga atttctgcca ttcatccgct tattatcact tattcaggcg
3301 tagcaccagg cgtttaaggg caccaataac tgccttaaaa aaattacgcc ccgccctgcc
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3421 cggcatgatg aacctgaatc gccagcggca tcagcacctt gtcgccttgc gtataatatt
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3721 aaacggtgta acaagggtga acactatccc atatcaccag ctcaccgtct ttcattgcca
3781 tacggaattc cggatgagca ttcatcaggc gggcaagaat gtgaataaag gccggataaa
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5341 tgacagctta tc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pBAD33大肠表达质粒
别称: pBAD-33
| 启动子: | araBAD |
|---|---|
| 复制子: | p15A |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体；pBAD系列表达质粒 |
| 质粒大小: | 5352bp |
| 原核抗性: | Chl |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 推荐LMG194 |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 诱导方式: | 阿拉伯糖 |
| 5'测序引物: | pBAD-F: ATGCCATAGCATTTTTATCC |
| 3'测序引物: | pBAD-R: GATTTAATCTGTATCAGG |
质粒属性
| 载体宿主： | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Chl |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pBAD33是一个大肠杆菌pBAD系列表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
OCUS Exported 5352 bp ds-DNA circular SYN 17-9-2015
KEYWORDS Untitled 3
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5352)
AUTHORS admin
TITLE Direct Submission
JJOURNAL Exported 2015-9-17 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
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KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
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origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
ORIGIN
1 atcgatgcat aatgtgcctg tcaaatggac gaagcaggga ttctgcaaac cctatgctac
61 tccgtcaagc cgtcaattgt ctgattcgtt accaattatg acaacttgac ggctacatca
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3121 tcctgttacc agtcaggcat ttgagaagca cacggtcaca ctgcttccgg tagtcaataa
3181 accggtaaac cagcaataga cataagcggc tatttaacga ccctgccctg aaccgacgac
3241 cgggtcgaat ttgctttcga atttctgcca ttcatccgct tattatcact tattcaggcg
3301 tagcaccagg cgtttaaggg caccaataac tgccttaaaa aaattacgcc ccgccctgcc
3361 actcatcgca gtactgttgt aattcattaa gcattctgcc gacatggaag ccatcacaga
3421 cggcatgatg aacctgaatc gccagcggca tcagcacctt gtcgccttgc gtataatatt
3481 tgcccatggt gaaaacgggg gcgaagaagt tgtccatatt ggccacgttt aaatcaaaac
3541 tggtgaaact cacccaggga ttggctgaga cgaaaaacat attctcaata aaccctttag
3601 ggaaataggc caggttttca ccgtaacacg ccacatcttg cgaatatatg tgtagaaact
3661 gccggaaatc gtcgtggtat tcactccaga gcgatgaaaa cgtttcagtt tgctcatgga
3721 aaacggtgta acaagggtga acactatccc atatcaccag ctcaccgtct ttcattgcca
3781 tacggaattc cggatgagca ttcatcaggc gggcaagaat gtgaataaag gccggataaa
3841 acttgtgctt atttttcttt acggtcttta aaaaggccgt aatatccagc tgaacggtct
3901 ggttataggt acattgagca actgactgaa atgcctcaaa atgttcttta cgatgccatt
3961 gggatatatc aacggtggta tatccagtga tttttttctc cattttagct tccttagctc
4021 ctgaaaatct cgataactca aaaaatacgc ccggtagtga tcttatttca ttatggtgaa
4081 agttggaacc tcttacgtgc cgatcaacgt ctcattttcg ccaaaagttg gcccagggct
4141 tcccggtatc aacagggaca ccaggattta tttattctgc gaagtgatct tccgtcacag
4201 gtatttattc ggcgcaaagt gcgtcgggtg atgctgccaa cttactgatt tagtgtatga
4261 tggtgttttt gaggtgctcc agtggcttct gtttctatca gctgtccctc ctgttcagct
4321 actgacgggg tggtgcgtaa cggcaaaagc accgccggac atcagcgcta gcggagtgta
4381 tactggctta ctatgttggc actgatgagg gtgtcagtga agtgcttcat gtggcaggag
4441 aaaaaaggct gcaccggtgc gtcagcagaa tatgtgatac aggatatatt ccgcttcctc
4501 gctcactgac tcgctacgct cggtcgttcg actgcggcga gcggaaatgg cttacgaacg
4561 gggcggagat ttcctggaag atgccaggaa gatacttaac agggaagtga gagggccgcg
4621 gcaaagccgt ttttccatag gctccgcccc cctgacaagc atcacgaaat ctgacgctca
4681 aatcagtggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggcggc
4741 tccctcgtgc gctctcctgt tcctgccttt cggtttaccg gtgtcattcc gctgttatgg
4801 ccgcgtttgt ctcattccac gcctgacact cagttccggg taggcagttc gctccaagct
4861 ggactgtatg cacgaacccc ccgttcagtc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg
4921 tcttgagtcc aacccggaaa gacatgcaaa agcaccactg gcagcagcca ctggtaattg
4981 atttagagga gttagtcttg aagtcatgcg ccggttaagg ctaaactgaa aggacaagtt
5041 ttggtgactg cgctcctcca agccagttac ctcggttcaa agagttggta gctcagagaa
5101 ccttcgaaaa accgccctgc aaggcggttt tttcgttttc agagcaagag attacgcgca
5161 gaccaaaacg atctcaagaa gatcatctta ttaatcagat aaaatatttg ctcatgagcc
5221 cgaagtggcg agcccgatct tccccatcgg tgatgtcggc gatataggcg ccagcaaccg
5281 cacctgtggc gccggtgatg ccggccacga tgcgtccggc gtagaggatc tgctcatgtt
5341 tgacagctta tc
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1594/ptdTomato-C1哺乳荧光质粒 |
| P0475/pmCherry-N1哺乳荧光质粒 |
| P0151/pmCherry-C1哺乳荧光质粒 |
| P0152/pDsRed-Monomer-N1哺乳荧光质粒 |
| P0332/pDsRed-Express2-N1哺乳荧光质粒 |
| P0717/PA-mCherry1-C1哺乳荧光质粒 |
| P0718/PA-mCherry1-N1哺乳荧光质粒 |
| P0869/pDsRed1-C1哺乳荧光质粒 |
| P0918/pmScarlet-C1哺乳荧光质粒 |
| P0652/pCAG-DsRed1哺乳荧光质粒 |
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