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- Xybio
- 上海
- P4254
- 2026年04月18日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pMD-AOX-Laccase
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pMD-AOX-Laccase酵母表达质粒
别称: pMD-AOX-Laccase
复制子: pUC
原核抗性: Kan
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：酵母菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：
基因类型：ORF
原核抗性：Kan
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：
质粒简介
pMD-AOX-Laccase酵母表达质粒
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4921/pCMV-SPORT6-RACK1人源基因质粒 |
| P4922/pCMV-SPORT6-ALDH16A1人源基因质粒 |
| P4923/pCMV-SPORT6-COASY（277-1695bp）人源基因质粒 |
| P4924/pCMV-SPORT6-TMEM184A人源基因质粒 |
| P4925/pCMV-SPORT6-PAK4人源基因质粒 |
| P3648/pCMV-SPORT6-ZG16B人源基因质粒 |
| P3649/pCMV-SPORT6-DNAJC19(1同义突变）人源基因质粒 |
| P3650/pCMV-SPORT6-CCNDBP1人源基因质粒 |
| P3651/pCMV-SPORT6-VPS45人源基因质粒 |
| P3652/pCMV-SPORT6-CNP（9-1266bp）人源基因质粒 |
| P3653/pCMV-SPORT6-WBP2人源基因质粒 |
| P3654/pCMV-SPORT6-CDK18(1点突变）人源基因质粒 |
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文献和实验或者进入 google，点击」图片搜索」，直接查找图谱。 5. 寒梅砺剑阁（热心生物人整理的） http://yoou.bokee.com/5757561.html 6. 其他的一些核酸数据库 方法三：一些重要试剂公司网页 这些网站除了得到质粒图谱等信息，还可以得到关于质粒使用方面的信息，现在很多质粒，特别是应用比较广泛的质粒都一些公司商业化的质粒，基本是由一个质粒你就会联想到一个公司的名字。 比如简单的，克隆载体 pMD18-T
数据库 方法三：一些重要试剂公司网页 其实也是一些网站，因为这些网站除了得到质粒图谱等信息，还可以得到关于质粒使用方面的信息，因此单独拿出来做一个分类。现在很多质粒，特别是应用比较广泛的质粒都一些公司商业化的质粒，基本是由一个质粒你就会联想到一个公司的名字。 比如简单的，克隆载体pMD18-T，TaKaRa，有木有；pGM-T，天根，有木有； 一些表达载体，使用最广泛的，pET系列，Novagen公司（默克）的；有双MCS的Duet系列载体，Novagen的；毕赤酵母表达质粒
integration into ribosomal DNin yeast)质粒，旨在将目的基因靶向整合到rDNA簇上(rDNA簇为酵母基因组中串联存在的150个重复序列)，因此利用pMIRY2质粒可以得到100个以上的拷贝。值得注意的是，酿酒酵母表达的外源蛋白质往往被高度糖基化，糖链上可以带有40个以上的甘露糖残基，糖蛋白的核心寡聚糖链含有末端仅1,3甘露糖，产物的抗原性明显增强。所以，酿酒酵母常常用来制备亚单位疫苗(如HBV疫苗、口蹄疫疫苗等)。（2）甲醇营养型酵母表达系统 甲醇营养型酵母包括汉森酵母
