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- Xybio
- 上海
- P2140
- 2026年04月17日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#12858;DNApolymerase
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：DCT.VV.Orf170聚合酶基因质粒
别称: Plasmid#12858;DNApolymerase
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：
质粒简介
DCT.VV.Orf170质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3945/pCMV-SPORT6-CCNK人源基因质粒 |
| P3946/pCMV-SPORT6-PEPD人源基因质粒 |
| P3947/pCMV-SPORT6-VIPAS39人源基因质粒 |
| P3948/pCMV-SPORT6-GALM人源基因质粒 |
| P3949/pCMV-SPORT6-CD73人源基因质粒 |
| P3950/pCMV-SPORT6-CASP7-T12G人源基因质粒 |
| P3951/pCMV-SPORT6-PDK3人源基因质粒 |
| P3952/pCMV-SPORT6-DHRS1-T26C人源基因质粒 |
| P3953/pCMV-SPORT6-LDHB人源基因质粒 |
| P3954/pCMV-SPORT6-DPF2人源基因质粒 |
| P3955/pCMV-SPORT6-TIA1人源基因质粒 |
| P3956/pCMV-SPORT6-MAP1LC3A人源基因质粒 |
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文献和实验，Transposon，转座子 TMV ，tobacco mozic virus，烟草花叶病毒 tRNA ，tuansfer RNA，转移RNA tk ，thymidine kinase gene，胸腺激酶基因 TCID50 ，Tissue culture infective dose，半数组织培养感染剂量 Ti ，tumor inducing plasmid，Ti质粒 UV ，ultraviolet light，紫外光 UTR ，rn
发表[1，2，3]。国内针对外源基因在原核细胞中高效表达的关键因素，构建了高效表达载体[4]，并在此基础上成功表达了一系列细胞因子的基因[5，6，7]。我们在分析了国内外有关在原核系统中表达蛋白的实验资料的基础上，对在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略所涉及的内容进行全面的总结，以期有助于我国在这方面的研究。 1.有效表达载体的构型 构建表达质粒需要多种元件，需要仔细考虑它们的组合，以保证最高水平的蛋白质合成。E.coli 表达载体的基本结构[8]。 启动子(以杂和的tac 启动子为例
编码基因，(2)将相应的编码蛋白制成相应抗体探针，从cDNA入载体表达库中筛选相应克隆。功能克隆是一种经典的基因克隆策略，很多基因的分离利用这种策略。Hain等从葡萄中克隆了两个编码白藜芦醇合成的二苯乙烯合成酶基因(Vst1和Vst2)，葡萄中抗菌化合物白藜芦醇的存在，可以提高对灰质葡萄孢(Botrytis cinerce)的抗性，在烟草和其它一些植物中无二苯乙烯合成酶，因此克隆该基因经过转基因后，对有些植物产生对灰质葡萄孢的抗性很有意义(Hain等，1985)。Kondo等1989年对编码水稻巯基
