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- Xybio
- 上海
- P0601
- 2026年04月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_001132255.1;BIRC5;API4;EPR-1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pShuttle-Survium病毒基因质粒
别称: NM_001132255.1;BIRC5;API4;EPR-1
质粒分类: 基因文库质粒
原核抗性: Kan
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：病毒
基因类型：ORF
原核抗性：Kan
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
Pongo abelii baculoviral IAP repeat containing 5 (BIRC5), mRNA
质粒图谱
质粒序列
atgggtgccc cgacgttgcc ccctgcctgg cagccctttc tcaaggacca
121 ccgcatctct acattcaaga actggccctt cttggagggc tgcgcctgca ccccggagcg
181 gatggccgag gctggcttca tccactgccc cactgagaac gagccagact tggcccagtg
241 tttcttctgc ttcaaggagc tggaaggctg ggagccagat gacgacccca tagaggaaca
301 taaaaagcat tcgtccggtt gcgctttcct ttctgtcaag aagcagtttg aagaattaac
361 ccttggtgaa tttttgaaac tggacagaga aagagccaag aacaaaattg caaaggaaac
421 caacaataag aagaaagaat ttgaggaaac tgcgaagaaa gtgcgccgtg ccatcgagca
481 gctggctgcc atggattga
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2671/pCDEF-FLAG-β-catenin-S675A人源基因质粒 |
| P0548/pCDEF-FLAG-IRF3人源基因质粒 |
| P0549/pCDNA3-NR3C1人源基因质粒 |
| P0550/C-Myc人源基因质粒 |
| P0551/SOX2人源基因质粒 |
| P0552/HA-p73α-pCDNA3人源基因质粒 |
| P0553/pEGFP-C3-STING人源基因质粒 |
| P0556/pCDNA3.1(+)-hIAPP人源基因质粒 |
| P0557/pCDNA3.1-adiponetin人源基因质粒 |
| P0560/pCDNA3-FLAG-DHX36人源基因质粒 |
| P0621/pCMV-SGLT1人源基因质粒 |
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文献和实验1 、目的基因的获取： （ 1 ）特定细胞表达的目的基因：提取 RNA 后进行反转录， PCR 扩增； （ 2 ）载体中含有的目的基因：酶切或 PCR 获取； （ 3 ）融合蛋白基因：根据需求，进行 PCR 合成目的基因； 2 、穿梭质粒的构建： （ 1 ）携带目的基因的穿梭质粒的构建：通过酶切、连接的方式得到，一般采用的是 pShuttle-cmv 载体； （ 2 ）携带多个目的基因的穿梭质粒的构建：如同时表达两个目的
已被国内许多实验室所采用。然而，由于在大肠杆菌中腺病毒序列的遗传选择压力较小，发生突变导致腺病毒活力下降的可能性就大大高于前面提到的真核细胞内重组的方法。这种方法的共同特点是：重组系统由两种质粒组成，一种是包含有全部（或右侧大部分）腺病毒基因组DNA的大质粒（骨架质粒）；另一种是小的穿梭质粒，其带有目的基因表达盒以及在表达盒两侧的与大质粒上的目的基因拟插入部位同源的序列（左、右臂 Left Right Arm）。这种方法通常的操作流程是：首先，将目的基因亚克隆到穿梭载体中，经过一个在穿梭载体左右臂之间
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