pExpress-Beclin1-r大鼠基因质粒

基本信息
名称：pExpress-Beclin1-r大鼠基因质粒
别称: NM_001034117.1
复制子: pUC
质粒分类:  基因文库质粒；大鼠基因质粒；大鼠真核质粒
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度

质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：大鼠
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：

质粒简介
 pExpress-Beclin1-r质粒由武汉淼灵生物科技有限公司构建并分享至淼灵质粒平台。
           Rattus norvegicus beclin 1 (Becn1), transcript variant 2, mRNA，NCBI Reference Sequence: NM_001034117.1.

质粒图谱


质粒序列
ORIGIN
        1 atggaggggt ctaaggcgtc cagcagcacc atgcaggtga gcttcgtgtg ccagcgctgt
       61 agccagcctc tgaaactgga cacgagcttc aagatcctgg accgagtgac cattcaggaa
      121 ctcacagctc cattacttac cacagcccag gcgaaaccag gagagagcca ggaggaagag
      181 gctaactcag gagaggagcc atttattgaa actcgccagg atggtgtctc tcgaagattc
      241 atccccccag ccaggatgat gtctacagaa agtgctaata gcttcactct gatcggggag
      301 gcatctgatg gtggcaccat ggagaacctc agccggagac tcaaggtcac tggagacctt
      361 tttgacatca tgtctggcca gacagatgtg gatcacccac tgtgtgagga atgcacagat
      421 actcttttag accagctgga cactcagctc aatgttactg aaaacgagtg tcagaactac
      481 aaacgctgtt tggagatgtt ggagcaaatg aatgagggcg acagtgaaca gctacagagg
      541 gagctgaagg agttggcctt ggaggaggag aggctgatcc aggagctgga agatgtggaa
      601 aaaaaccgaa aggtggtggc agaaaacctg gagaaggtcc aggctgaggc ggagagactg
      661 gaccaggagg aagctcagta ccagcgagaa tatagtgaat ttaaaaggca gcagctggag
      721 ctggatgatg agctcaagag tgtagagaac cagatgcgct atgcccagat gcagctggac
      781 aagctcaaga aaaccaatgt cttcaatgcg accttccata tctggcacag cggacaattt
      841 ggcacgatca ataatttcag actgggtcgc ttgcccagtg ctcctgtgga atggaatgaa
      901 atcaatgctg cctggggcca gacagtgttg ttgctccatg ctttggccaa taagatgggt
      961 ctgaaatttc agaggtaccg acttgttccc tatggaaatc actcgtatct ggagtccctg
     1021 acagacaaat ctaaggagtt gccgttgtac tgttctgggg gtttgcggtt tttctgggac
     1081 aacaagtttg accatgcaat ggtagctttt ctggactgtg tgcagcagtt caaagaagag
     1141 gtggaaaaag gagagactcg attttgtctt ccgtacagga tggacgtgga gaaaggcaag
     1201 attgaagaca ctggaggcag tggcggctcc tattccatca aaacccagtt taactctgag
     1261 gagcagtgga caaaggcgct caagttcatg ctgacgaatc tcaagtgggg tcttgcttgg
     1321 gtgtcctcac agttctataa caagtga
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
              ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
              ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
              ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
              ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
              ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
              四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

二、转化图片

P4015/pCMV-SPORT6-NABP1人源基因质粒

P4016/pCMV-SPORT6-SLC16A5（1同义突变）人源基因质粒

P4017/pCMV-SPORT6-SLBP人源基因质粒

P4018/pCMV-SPORT6-TM9SF1人源基因质粒

P4019/pCMV-SPORT6-SNAP29（1同义突变）人源基因质粒

P4020/pCMV-SPORT6-BCOR人源基因质粒

P4021/pCMV-SPORT6-HEBP1人源基因质粒

P4022/pCMV-SPORT6-CALCOCO2人源基因质粒

P4023/pCMV-SPORT6-BCL2A1人源基因质粒

P4024/pCMV-SPORT6-TDP2人源基因质粒

P4025/pCMV-SPORT6-HSPA8（1同义突变）人源基因质粒